冰片对大鼠全脑缺血再灌注损伤后血脑屏障及胞浆附属蛋白-1的影响

发布时间：2017-04-02 03:18

  本文关键词：冰片对大鼠全脑缺血再灌注损伤后血脑屏障及胞浆附属蛋白-1的影响，由笔耕文化传播整理发布。

【摘要】：目的：在大鼠全脑缺血再灌注损伤动物模型上观察冰片对脑缺血再灌注损伤后24h、48h和72h后血脑屏障通透性及Zonula Occludens-1(ZO-1)蛋白表达的影响,从而探讨冰片对全脑缺血再灌注损伤中的保护作用。 方法：清洁级雄性Wistar大鼠96只,体重240g-280g,随机分为4组(n=24)：假手术组(Sham组)、全脑缺血再灌注模型组(Model组)、溶剂对照组(Solvent组,70%乙醇溶液灌胃)和冰片组(Borneol组,0.2g/Kg体重灌胃给药)。以Pulsinelli四血管法(4VO)建立大鼠全脑缺血再灌注模型。在脑缺血20min后再灌注24h、48h和72h三个时间点,分别采用干湿法测定脑组织的含水量,采用伊文思蓝(Evans Blue,EB)染色法观测脑缺血再灌注损伤后血脑屏障(Blood Brain Barrier,BBB)的完整性；以及免疫组织化学法和蛋白质印记法观测海马区ZO-1的表达变化。 结果：在成功复制大鼠全脑缺血再灌注动物模型的基础上观测到： (1)模型组、溶剂对照组和冰片组大鼠在电凝椎动脉后,再夹闭双侧颈总动脉60s内可出现意识丧失；双侧瞳孔散大、角膜反射消失；翻正反射消失。 (2)在脑缺血再灌注48h和72h,模型组和溶剂对照组大鼠的脑组织含水量显著高于假手术组和冰片组。 (3)伊文思蓝染色显示脑缺血再灌注后血脑屏障完整性受到破环。假手术组在脑缺血再灌注24h、48h和72h均未见明显蓝染区,测定脑组织内EB含量少；而模型组、溶剂对照组和冰片组在再灌注24小时均可见明显蓝染区,此外测定脑内EB含量显著高于假手术组水平(P0.05)；但是在再灌注后48h和72h,模型组和溶剂对照组的EB含量显著高于假手术组和冰片组(P0.05),而冰片组脑内EB含量仅高于假手术组(P0.05)。 (4)免疫组织化学显示：在全脑缺血再灌注后24h,海马区模型组、溶剂对照组和冰片组的ZO-1阳性细胞数目显著低于假手术组(P0.05)；而在再灌注后48h和72h,模型组和溶剂对照组的ZO-1阳性细胞数目显著低于假手术组和冰片组(P0.05),而冰片组的阳性细胞数目仍显著低于假手术组(P0.05) (5)蛋白质印迹表明：模型组、溶剂对照组和冰片组的海马区ZO-1蛋白表达水平,在脑缺血再灌注后24h显著低于假手术组(P0.05)；而在再灌注后48h和72h,模型组和溶剂对照组的ZO-1蛋白表达水平显著低于假手术组和冰片组(P0.05),而冰片组的ZO-1仍显著低于假手术组(P0.05) 结论： (1)大鼠全脑缺血再灌注损伤后血脑屏障的完整性受到破环,通透性增大,出现EB的渗漏。 (2)大鼠全脑缺血再灌注后,海马中与血脑屏障构成相关的ZO-1蛋白表达下降,因而脑缺血再灌注损伤后血脑屏障的破坏可能与ZO-1蛋白减少有关。 (3)冰片干预后可显著改善大鼠全脑缺血再灌注损伤后血脑屏障的通透性；可能与上调大鼠ZO-1蛋白水平的表达有关。
【关键词】：冰片 ZO-1 血脑屏障 大鼠全脑缺血再灌注损伤
【学位授予单位】：新乡医学院
【学位级别】：硕士
【学位授予年份】：2014
【分类号】：R743.3;R-332
【目录】：

• 摘要5-7
• Abstract7-9
• 前言9-11
• 材料和方法11-25
• 结果25-32
• 讨论32-36
• 小结36-37
• 参考文献37-41
• 综述41-48
• 参考文献44-48
• 附录48-49
• 攻读学位期间发表文章情况49-50
• 致谢50-51
• 个人简历51

【参考文献】

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本文编号：281797