雌二醇对失血性休克家兔肝肾的保护作用

发布时间：2020-10-30 02:00

　　 目的通过检测失血性休克家兔肠系膜微循环、肝肾组织中IL-6表达、CD68巨噬细胞浸润情况以及血清中IL-6,IL-8含量的变化,探讨雌激素对失血性休克家兔肠系膜微循环的影响以及对肝、肾重要器官的保护作用机制.方法将家兔随机分为5组,即模型组(MD组)、生理盐水治疗组(NC组)、雌二醇治疗组(ET组)、山莨菪碱治疗组(AN组)和雌二醇预防组(EP组).采用Chaudry方法复制家兔失血性休克模型,并记录肠系膜微循环变化,分别于休克前、休克Ⅱ期1 h、治疗后2 h采血,分离血清,备用.在预定时间段取肝、肾组织,石蜡包埋,HE切片,行光学显微镜观察,通过免疫组化法检测家兔肝、肾组织中IL-6,CD68的表达情况,酶联免疫吸附法(ELISA)测定血清中IL-6,IL-8浓度的变化.结果休克治疗2 h后,雌二醇预防组、山莨菪碱治疗组的微循环明显优于其他组; HE染色发现雌二醇预防组、山莨菪碱治疗组肝、肾组织损伤程度较生理盐水治疗组、模型组损伤程度轻;雌二醇预防组和山莨菪碱治疗组肝、肾组织IL-6阳性表达率和CD68阳性巨噬细胞浸润程度低于其他组;血清学检查休克Ⅱ期1 h、雌二醇预防组血清IL-6,IL-8浓度低于其他组,差异具有统计学意义(P0.05);治疗后2 h,雌二醇预防组和山莨菪碱治疗组血清中IL-6和IL-8浓度低于其他组,差异具有统计学意义(P0.05).结论雌激素可改善失血性休克家兔肠系膜的微循环,对肝、肾具有一定的保护作用.
【部分图文】：

，通过回输和抽血维持血压在40mmHg上下，即休克Ⅱ期．维持1h后，分别从颈静脉输血、输液进行治疗．雌二醇预防组:血液回输+补液(失血量的2倍);山莨菪碱治疗组:血液回输+山莨菪碱2．5mg/kg+补液(失血量的2倍);雌二醇治疗组:雌二醇(500μg，皮下注射)+血液回输+补液(失血量的2倍);生理盐水治疗组:血液回输+补液(失血量的2倍);模型组，不进行治疗．见图1．实验各时间段颈动脉留存休克前、休克Ⅱ期1h、治疗后2h的血液样本．图1家兔饲养及造模过程Fig．1Theprocessoffeedingandmodeling1．4微循环观察应用BI-2000微循环仪观察家兔肠黏膜血管数量、血管壁变化、血流流态及血细胞聚集情况．1．5HE染色在预定时间段给家兔放血，取肝、肾，肝叶、肾均沿矢状面剖开，4%甲醛固定，石蜡包埋，切片厚5μm，HE染色，光学显微镜对比观察各组器官的组织变化．1．6免疫组织化学染色检测各器官组织内IL-6表达及巨噬细胞浸润采用双盲法阅片，由两个病理医师独立完成．结果判定IL-6和CD68胞浆表达黄色或棕褐色颗粒为阳性表达．评分标准:选择染色均匀的区域，每张切片中随机选取高倍视野(×400)10个，每个视野计数100个细胞，记录阳染细胞的数量，累计相加各个视野的阳性细胞总数，再计算细胞的阳性率．阳性细胞数≥10%为(+)，阳性细胞数＜25%判定为1分，26%～50%为2分，51%～74%为3分，＞75%为4分．细胞染色强度(根据着色细胞占视野细胞的百分率)分为4个等级:无染色0分，淡黄色1分，棕黄色2分，深褐色3?

呈缺氧状态，并黏附聚集在血管壁上，镜下可见血管壁增厚、变形，终末小血管彻底断流．见图2C．雌二醇预防组家兔血液流态及血管变化总体要优于其他组别，但差异无统计学意义(P＞0．05)．见图2D．治疗2h后，各组家兔肠系膜微循环逐渐恢复，治疗过程中可见血液再灌注，淤积在血管内及血管壁上的血液团块逐渐被冲走，血管充盈，血液流态逐渐恢复到线粒流，终末小血管逐渐恢复，血液充盈，雌二醇预防组和山莨菪碱治疗组家兔血液流态明显优于其他组别(P＜0．05)．见图2E，2F．图2家兔肠系膜微循环各时间节点状态Fig．2Thetimenodesofmesentericmicrocirculationinrabbits2．2病理学观察2．2．1肝组织病理学观察HE染色后，光学显微镜下观察各组家兔肝组织的病理学改变:模型组肝组织内有大量中性粒细胞浸润，肝索崩解，肝细胞坏死，肝窦内充满血浆样物质．见图3A．生理盐水治疗组和雌二醇治疗组有大量的炎细胞浸润，肝细胞水肿、变性，肝索崩解，生理盐水治疗组较雌二醇治疗组病变程度重，其肝细胞出现水样变．见图3B、3C．山莨菪碱治疗组和雌二醇预防组肝细胞深染、水肿，有少量的炎细胞浸润，肝索形态稍有改变．见图3D，3E．图3家兔肝组织HE染色(×400)Fig．3HEstainingofrabbitlivertissue2．2．2肾组织病理学观察HE染色后，光学显微镜下观察各组家兔肾组织的病理学改变:模型组肾小管上皮细胞水肿、变性坏死，肾小管腔内有大量物质渗出．见图4A．生理盐水治疗组及雌二醇治疗组肾小管上皮细胞排列紊乱，管腔内有血浆样云絮状物质渗出．见图4B，4C．山莨菪碱治疗组和雌二醇预防组肾小管上皮细胞?

ationinrabbits2．2病理学观察2．2．1肝组织病理学观察HE染色后，光学显微镜下观察各组家兔肝组织的病理学改变:模型组肝组织内有大量中性粒细胞浸润，肝索崩解，肝细胞坏死，肝窦内充满血浆样物质．见图3A．生理盐水治疗组和雌二醇治疗组有大量的炎细胞浸润，肝细胞水肿、变性，肝索崩解，生理盐水治疗组较雌二醇治疗组病变程度重，其肝细胞出现水样变．见图3B、3C．山莨菪碱治疗组和雌二醇预防组肝细胞深染、水肿，有少量的炎细胞浸润，肝索形态稍有改变．见图3D，3E．图3家兔肝组织HE染色(×400)Fig．3HEstainingofrabbitlivertissue2．2．2肾组织病理学观察HE染色后，光学显微镜下观察各组家兔肾组织的病理学改变:模型组肾小管上皮细胞水肿、变性坏死，肾小管腔内有大量物质渗出．见图4A．生理盐水治疗组及雌二醇治疗组肾小管上皮细胞排列紊乱，管腔内有血浆样云絮状物质渗出．见图4B，4C．山莨菪碱治疗组和雌二醇预防组肾小管上皮细胞排列较整齐，管腔内渗出物少，雌二醇预防组肾小管上皮细胞部分深染．见图4D，4E．图4家兔肾组织HE染色(×40)Fig．4HEstainingofrabbitkidneytissue2．3肝、肾组织内IL-6表达及巨噬细胞的浸润情况2．3．1IL-6在肝组织内表达情况免疫组织化学染色显示:胞质表达棕黄色或棕846北华大学学报(自然科学版)第20卷
【参考文献】

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【共引文献】

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【二级参考文献】

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本文编号：2861802