TGF-β2对SD大鼠髁突软骨细胞表型维持作用的研究

发布时间：2017-04-06 00:06

  本文关键词：TGF-β2对SD大鼠髁突软骨细胞表型维持作用的研究，由笔耕文化传播整理发布。

【摘要】：[目的]观察单层培养的大鼠髁突软骨细胞连续传代中表型的变化,研究TGF-β2作用后Ⅱ型胶原、聚集蛋白多糖表达的变化,对细胞表型的维持作用。探讨TGF-β2对于去分化软骨细胞的活化作用,为髁突生长发育及软骨细胞源性组织工程研究提供依据。 [方法]选用新生SD大鼠的髁突软骨作为原代培养的组织来源,建立髁突软骨细胞有限细胞系。髁突软骨细胞连续传代培养,通过观察细胞形态,Ⅱ型胶原的免疫组化染色,实时荧光定量PCR(real time quantitative polymerase chain reaction, RT-PCR)方法检测软骨细胞外基质中Ⅱ型胶原和聚集蛋白多糖mRNA的表达,观察单层培养的大鼠髁突软骨细胞连续传代细胞表型的变化；在相同培养条件下,加入80ng/ml TGF-β2,以相同方法研究TGF-β2对髁突软骨细胞表型的维持和对于去分化软骨细胞的活化作用。 [结果]髁突软骨细胞表型随着细胞传代逐渐降低,软骨细胞逐渐由多角形变为长梭形,至第五代时软骨细胞表型基本完全丧失。第三至五代加入80ng/ml TGF-β2组体外培养的髁突软骨细胞Ⅱ型胶原及聚集蛋白多糖的表达较对照组增强。TGF-β2对于一、二代细胞Ⅱ型胶原及聚集蛋白多糖的表达增强不明显。对于第三代开始去分化的软骨细胞,TGF-β2有较强的活化作用。 [结论]髁突软骨在连续传代培养中,细胞表型逐渐丧失；传代至第三代时细胞表型开始丧失,至第五代时细胞表型基本完全丧失。一定浓度的TGF-β2对髁突软骨细胞的Ⅱ型胶原和聚集蛋白多糖合成具有维持作用,特别是对三、四、五代软骨细胞作用明显；同时对开始去分化的髁突软骨细胞TGF-β2也有一定的活化作用,但活化作用相对有限。
【关键词】：髁突软骨细胞 细胞表型 TGF-β2
【学位授予单位】：昆明医科大学
【学位级别】：硕士
【学位授予年份】：2014
【分类号】：R329.2
【目录】：

• 英文缩写词表5-6
• 中文摘要6-8
• Abstract8-9
• 引言9-11
• 第一部分 髁突软骨细胞的建立及TGF-β2对髁突软骨细胞表型维持作用11-25
• 1. 材料11
• 2. 方法11-15
• 3. 结果15-21
• 4. 讨论21-24
• 5. 结论24-25
• 第二部分 TGF-β2对于去分化髁突软骨细胞的活化作用25-35
• 1. 材料25
• 2. 方法25-29
• 3. 结果29-33
• 4. 讨论33-34
• 5. 结论34-35
• 全文总结35-36
• 参考文献36-40
• 综述40-48
• 参考文献44-48
• 发表文章48-49
• 致谢49

【参考文献】

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本文编号：287905