伯氏疟原虫氯喹抗性株和敏感株致病力差异的研究及其机制的探讨

发布时间：2020-11-20 05:24

　　 疟疾是世界上最重要的感染性疾病之一。近年来，由于疟原虫对抗疟药， 特别是氯喹，产生抗药性并且迅速的扩散，到九十年代，有恶性疟原虫分布的 地区几乎都有抗氯喹恶性疟原虫株的存在。另一方面，由于疟原虫抗原的多态 性和变异以及宿主遗传背景的限制性，使疟疾疫苗的研究进展很慢。为此，人 们除了继续从事疟疾疫苗的研究外，逐渐把目光转移到寻找预防发生重症疟 疾、减缓疟疾病症、降低疟疾死亡率的新途径。伯氏疟原虫氯喹抗性（RC） 株是药物敏感（N）株经药物筛选获得，N株是致死性虫株，RC株感染后能自 愈康复。因此，本研究以该对虫株作为对象，探索两者致病力的差异及其机 制。 1．致病力差异： 1）原虫血症与体温和体重的关系：N株疟原虫以1×10_6个感染疟原虫红细胞／鼠 腹腔接种小鼠后第9天开始出现死亡，第11天全部小鼠死亡，死亡率为100％。 体重（体重／原始体重×％）在感染后的前6天呈上升趋势，随后逐渐减轻；体 温在感染后的前7天维持在37℃左右，随后逐渐下降，直到死亡。RC株疟原 虫以1×10_6个感染疟原虫红细胞／鼠腹腔接种小鼠后第24天出现死亡，死亡 率为25％，第36天时，绝大多数感染小鼠原虫血症消失。体重（体重／原始体 重×％）在感染后最初16天呈上升趋势，随后逐渐减轻。体温在感染后的前16 天维持在36.5℃左右。在第26～28天时，感染鼠体重降至92.60％± 4.59％（n＝6），体温也降至29.90±0.58℃（n＝6）。第36天时，体重恢复至105.00 ±5.80（n＝6），体温升至36.70±0.24℃（n＝6）。 2）红细胞数、脾重和肝重的差异：N株和RC株疟原虫感染后，原虫血症分别 达到64.82±6.65％和63.35±9.66％时，红细胞计数、脾重和肝重占体重的百 分比分别为2.45×10_6／mm_3±1.19×10_6／mm_3，1.71％±0.51％，7.20％±0.49％和 2.01×10_6／mm_3±0.79×10_6／mm_3，4.08％±1.12％，8.68％±1.18％。与正常组的红 细胞计数仿．64 X 10‘／inln3士0．75 X 10fyIYUn勺、脾重占体重的百分比O．53Ol 0刀6叨和肝重占体重的百分比（．23％土0．29叨比较，差异非常显著（P＜0刀1人 N株感染小鼠与RC株感染小鼠相比，红细胞计数的差异不显著（P＞0刀5）， 脾重占体重的百分比差异非常显著o吻刀1），肝重占体重的百分比差异显著 （＜0刀5）。 3）病理组织学的动态变化：N株感染小鼠肝、脾有较多的疟色素沉着，肺脏 呈郁血性水肿。脑微血管充血和阻塞。感染疟原虫红细胞在脑、心、肺等器官 小静脉和毛细血管内滞留，各脏器呈急性炎症的病理变化特点。RC株感染小 鼠肝、脾脏的病理组织学改变与原虫血症的变化有关。肺脏呈间质性肺炎，各 脏器呈慢性增生性炎症的病理变化特点。 4）超微结构的病理变化：N株感染后期小鼠脑部微血管含有较多的感染疟原虫 红细胞和红细胞，呈堵塞状态，肺毛细血管内皮细胞有多个突起与感染疟原虫 红细胞相接触。较多的肝、肾、肺实质细胞出现膜破溃，胞质流失，线粒体肿 胀等不可逆的坏死性病变。RC株感染后期鼠肝、肾实质细胞的病变以线粒体 肿胀为主的变性。可见肝脏部分变性肝细胞出现恢复状态，肾小球毛细血管内 皮细胞下、基膜、系膜区可见电子致密物沉着，肺脏的肺泡隔内可见较多的淋 巴细胞、巨噬细胞和嗜中性白细胞。 2．伯氏疟原虫氯喳抗性株和敏感株感染鼠细胞因子mRNA表达、 血清细胞因子浓度、DC细胞活化及免疫应答反应的差异 1）伯氏疟原虫氯喳抗性株红内期虫体的凋亡：在光镜和电镜下，原虫血症上 升期的RC株和N株虫体，结构无异常。基因组DNA电泳为单一条带。而 RC株感染小鼠自愈期虫体密度下降，大部分虫体固缩，周围呈空泡状。在 电镜下呈球形或长圆形，胞膜完整，核固缩，胞质浓缩，线粒体和膜状结构 消失，未见代谢窗结构。基因组DNA电泳呈典型的梯形条带。 2）脑、肝、脾组织细胞因子mRNA动态变化：应用 RTICR技术，比较伯氏 二 ‘疟原虫 RC株和 N株感染 ICR小鼠后，不同原虫血症时，脑、肝、脾组 织细胞mRNA的差异。结果显示N株和RC株感染小鼠后的脑组织中始终未 检出IFNInRNA和hFmRNA的表达。RC株感染小鼠肝、脾一直有IFNallA 和TNTInRNA的表达。原虫血症为10～20％和30～60％时，肝脏表达高于脾 脏。原虫血症达高峰时，仅有脾IFNmmA和hF删A和肝脏I刚侧A 的表达。原虫血症下降为 10～20％时，肝、脾 IFNInRNA和 TNFmRNA表
【学位单位】：第二军医大学
【学位级别】：博士
【学位年份】：2001
【中图分类】：R382.31
【文章目录】：
中文摘要
英文摘要
前言
第一部分 伯氏疟原虫氯喹抗性株和敏感株的致病力差异
    材料和方法
    实验结果
    讨论
    参考文献
第二部分 伯氏疟原虫氯喹抗性株和敏感株诱导感染鼠细胞因子、DC细胞活化及免疫应答反应的差异
    实验材料与方法
    结果
    讨论
    参考文献
第三部分 伯氏疟原虫氯喹抗性株和敏感株红内期虫体超微结构和基因组DNA的差异
    实验材料
    实验方法
    实验结果
    讨论
    参考文献
文献综述： TNF-α在疟原虫感染中的作用
致谢

【引证文献】

本文编号：2891014