HPLC同时测定关节炎大鼠血清色氨酸和犬尿氨酸

发布时间：2020-11-20 14:02

　　 建立新的高效液相色谱法(HPLC),检测佐剂性关节炎(AA)大鼠血清中色氨酸(Trp)和犬尿氨酸(Kyn)。SD大鼠成模后取血清,用蛋白沉淀法处理,离心后取上清液进样。考察该方法的专属性、标准曲线、精密度、回收率和稳定性等能否用于AA大鼠Trp和Kyn含量测定。Trp保留时间9.0 min,线性范围25～1 000μmol/L,检测限0.27μmol/L;Kyn保留时间5.6 min,线性范围0.5～10μmol/L,检测限0.07μmol/L;平均回收率在80%～120%范围之内;日内、日间精密度RSD均小于15%,符合生物样品定量分析方法要求,并可应用于AA大鼠血清中Trp和Kyn测定。建立了一种灵敏度高、快速的HPLC分析方法,适于测定AA大鼠血清中Trp和Kyn含量。
【部分图文】：

测波长:280nm;Kyn紫外检测波长:360nm;柱温:30℃;进样量:20μl。1．7统计学处理数据分析应用SPSS16.0软件处理，数据以x珋±s表示，两组数据之间比较采用t检验，多组之间采用单因素方差分析(ANOVA)，P＜0.05为差异有统计学意义。2结果2．1AA大鼠模型的建立模型组大鼠在免疫后第14天出现继发病变，出现足爪红肿，体质量减轻，全身评分、关节炎指数、关节肿胀数和足爪肿胀度明显增加，与正常组比较，差异有统计学意义(P＜0.01)。见图1～6。图1肉眼观察大鼠足爪肿胀A:对照组;B:模型组2．2HPLC方法学结果2．2．1专属性实验在1.6项色谱条件下分别对空白血清、空白血清加对照品溶液、供试品溶液进样分析，Trp保留时间9.0min，Kyn保留时间5.6min，峰形良好，样品中其他内源性物质不干扰测定，与杂质分离良好。结果见图7～9。图2大鼠全身评分与正常比较:＊＊P＜0.01图3大鼠关节炎指数与正常比较:＊＊P＜0.01图4大鼠关节肿胀数与正常比较:＊＊P＜0.01·4131·安徽医科大学学报ActaUniversitatisMedicinalisAnhui2019Aug;54(8)

天出现继发病变，出现足爪红肿，体质量减轻，全身评分、关节炎指数、关节肿胀数和足爪肿胀度明显增加，与正常组比较，差异有统计学意义(P＜0.01)。见图1～6。图1肉眼观察大鼠足爪肿胀A:对照组;B:模型组2．2HPLC方法学结果2．2．1专属性实验在1.6项色谱条件下分别对空白血清、空白血清加对照品溶液、供试品溶液进样分析，Trp保留时间9.0min，Kyn保留时间5.6min，峰形良好，样品中其他内源性物质不干扰测定，与杂质分离良好。结果见图7～9。图2大鼠全身评分与正常比较:＊＊P＜0.01图3大鼠关节炎指数与正常比较:＊＊P＜0.01图4大鼠关节肿胀数与正常比较:＊＊P＜0.01·4131·安徽医科大学学报ActaUniversitatisMedicinalisAnhui2019Aug;54(8)

大鼠关节炎指数
【参考文献】

相关期刊论文 前1条

1 宋珊珊;张玲玲;魏伟;;实验性关节炎动物模型建立及病理机制研究进展[J];中国药理学通报;2011年12期

【共引文献】

相关期刊论文 前10条

1 杨俊玲;卢军;刘晶;赵翡翠;聂继红;;白喉乌头及其炮制品对佐剂致类风湿性关节炎大鼠的实验研究[J];中成药;2015年11期

2 安泳潼;沈龙海;;西来昔布作为选择性COX-2抑制剂的药效学考察[J];中国医药工业杂志;2015年11期

3 朱亚梅;周玲玲;袁玉丽;周聪;刘慧;柳璋璞;陈雪;周学平;;清络通痹方与精简方的药效学比较[J];中国实验方剂学杂志;2015年18期

4 程林兵;龚雁;王金胜;缪晓青;;蜂毒制剂“神蜂精”对佐剂性关节炎大鼠血管表皮生长因子及其受体的影响[J];中国蜂业;2015年08期

5 张星华;杜小正;王金海;袁博;田亮;朱博雯;;类风湿关节炎动物模型在中医药研究中的进展[J];亚太传统医药;2015年13期

6 王昊;刘天盛;陈旭义;;青藤碱对胶原诱导性关节炎大鼠治疗作用[J];中华实用诊断与治疗杂志;2015年06期

7 杨俊玲;卢军;赵翡翠;聂继红;;类风湿性关节炎实验动物模型的研究进展[J];西北药学杂志;2015年03期

8 孙晓静;徐澍;贾晓益;魏芳;杨雪枝;常艳;魏伟;;大鼠佐剂性关节炎病程不同阶段T细胞亚群及重要器官的病理学变化[J];中国药理学通报;2015年04期

9 陈腊霞;王燕燕;孙伟光;许鑫;;复方鹿角霜对胶原诱导性关节炎模型小鼠抗炎作用研究[J];医药导报;2014年08期

10 周智;刘开祥;谢跃;王黎明;;低浓度硫化氢对类风湿性关节病变的软骨保护[J];中国组织工程研究;2014年11期

【二级参考文献】

相关期刊论文 前4条

1 张玲玲;刘云洁;童彤;吴颖其;赵文娣;李培培;魏伟;;DBA/1小鼠胶原性关节炎模型建立方法及评价指标[J];中国药理学通报;2010年08期

2 陈尹;魏伟;吴虹;唐丽琴;王晓玉;杨宇清;;木瓜苷对佐剂性关节炎大鼠血清抗体水平的下调作用[J];中国药理学通报;2007年07期

3 朱蕾;魏伟;郑咏秋;;白芍总苷对胶原性关节炎大鼠滑膜细胞的作用及机制[J];药学学报;2006年02期

4 张玲玲,沈玉先,魏伟;类风湿关节炎动物模型与临床的关系[J];中国药理学通报;2002年05期

【相似文献】

相关期刊论文 前10条

1 汤俊梅;张青;;前处理方法对大鼠血浆中犬尿氨酸含量的测定[J];安徽化工;2018年05期

2 齐保申,蔡英年;慢性缺氧对大鼠血清中血管紧张素转换酶活性的影响[J];中国医学科学院学报;1987年03期

3 李艳芳;刘宇扬;梁铁彪;王建龙;成万钧;;不同年龄大鼠血清胰岛素样生长因子Ⅱ水平的变化[J];中华老年心脑血管病杂志;2006年08期

4 马宇;王一彪;朱晓波;陈鸥;苏宏;索琳;;高肺血流性肺动脉高压大鼠血清、肺动脉壁组织中VEGF和CTGF的表达变化及意义[J];山东医药;2010年22期

5 何流琴;刘志强;伍力;印遇龙;马琴琴;李铁军;;缺乏赖氨酸对大鼠血清氨基酸含量和肠道氨基酸通透性的影响[J];营养学报;2012年03期

6 肖乐东;唐爱国;罗昔波;;分析前标本处理对血犬尿氨酸测定的影响[J];实用预防医学;2008年03期

7 程珊珊;陆菡;薛庆生;于布为;;泛素相关小修饰蛋白-1在大鼠脑发育过程中的差异性表达[J];上海医学;2012年08期

8 权琳;田珏;燕子;张苏丽;王可;刘慧荣;;衰老大鼠血管内皮舒张功能下降与iNOS升高的关系[J];中国病理生理杂志;2010年10期

9 李艳菊;胡亮杉;郭坤元;;间充质干细胞在衰老大鼠体内归巢的研究[J];中国老年学杂志;2009年07期

10 蔡亦蕴,施慎逊,徐三荣,孙大裕;慢性应激对大鼠脑脊液单胺类神经递质的影响[J];实用临床医药杂志;2005年01期

相关博士学位论文 前10条

1 白方会;正天丸和川芎嗪对偏头痛模型大鼠三叉神经血管系统神经递质表达的影响[D];南方医科大学;2016年

2 王成书;Apelin改善RUPP大鼠模型妊娠结局的作用机制探讨[D];河北医科大学;2016年

3 李少源;耳甲区电刺激对CUMS模型大鼠抗抑郁效应及ERK信号通路作用机制[D];中国中医科学院;2018年

4 李学勇;蒙医针刺治疗法对脑卒中后抑郁模型大鼠的作用机制研究[D];北京中医药大学;2017年

5 陈清杰;小檗碱对Ⅱ型糖尿病脑病模型大鼠认知功能影响的分子机制[D];华中科技大学;2018年

6 郭仪;益糖康调控DPN模型大鼠BDNF/TrkB系统抗DRG细胞凋亡的实验研究[D];辽宁中医药大学;2017年

7 阴晓峰;慢病毒介导Persephin基因修饰的骨髓间充质干细胞移植治疗大鼠帕金森模型的作用[D];青岛大学;2015年

8 曾玉群;大黄及其活性物质灌肠对慢性肾脏病模型大鼠作用的分子机制[D];广州中医药大学;2017年

9 高汉媛;自拟菖蒲郁金汤对多发性抽动症模型大鼠单胺类神经递质及多巴胺系统的影响[D];甘肃中医药大学;2017年

10 何小波;胸腺素β4在急性胰腺炎患者和大鼠模型中的作用及机制研究[D];武汉大学;2015年

相关硕士学位论文 前10条

1 郑雅竹;心肌缺血再灌损伤大鼠血清HSP25水平的动态变化及临床意义初探[D];中南大学;2008年

2 邹德龙;尖叶假龙胆对佐剂型关节炎模型大鼠的研究[D];黑龙江中医药大学;2017年

3 刘静;IL-33/ST2在人芽囊原虫感染大鼠模型中的表达研究[D];广西医科大学;2019年

4 张善磊;GLP-1类似物通过抑制下丘脑小胶质细胞激活降低DIO大鼠体重的相关研究[D];广西医科大学;2018年

5 刘俊兰;补脾益气法通过cAMP/PKA对脾气虚脾失健运大鼠胃肠激素的调控机理研究[D];辽宁中医药大学;2018年

6 蒋中业;16周HIIT与维生素E干预对增龄大鼠ROS-NFκB-Bnip3通路的影响[D];北京体育大学;2019年

7 熊庭旺;金钗石斛总生物碱对慢性应激诱导的焦虑模型大鼠的影响[D];遵义医科大学;2019年

8 代韵柯;CBS参与CCI大鼠背根神经节NF-κB痛觉调制作用的研究[D];遵义医科大学;2019年

9 龚佼;脂多糖诱导的幼龄大鼠小肠上皮自噬水平及谷氨酰胺对其调节作用的研究[D];西南医科大学;2019年

10 何丽;海马TLR4及TNF-α参与CCI大鼠神经痛的初步研究[D];遵义医科大学;2019年

本文编号：2891520