bcr/abl逆转录病毒介导的小鼠慢性粒细胞白血病样模型的建立
发布时间：2020-12-05 00:12
慢性粒细胞白血病（chronic myeloid leukemia,CML）是一种起源于异常多能造血干细胞的克隆增殖性疾病,bcr/abl融合基因的持续表达在该病的形成过程中起重要作用。目前,国内对CML发病机制和治疗的研究主要选用含有bcr/abl融合基因的体外细胞模型、bcr/abl转化的造血细胞株在小鼠体内的定殖模型或K562细胞移植裸鼠成皮下瘤后,再接种到免疫缺陷小鼠建立CML模型鼠的方法[1]。而利用逆转录病毒介导的小鼠骨髓转导、移植模型研究人类CML的发生、发展及其生物学特性,是20世纪90年代以来国外该领域研究的新进展[2],国内尚未见相关报道。本课题以bcr/ab逆转录病毒Mig210为载体,经包装细胞包装后收集病毒上清并测定滴度,感染经5-FU预处理的Balb/c雄性小鼠骨髓细胞,再回输到经致死剂量γ射线照射后的同种雌性受体鼠中,首次成功建立了CML小鼠移植模型。并在此基础上又建立了再次移植模型。其主要方法、结果及结论如下:1.bcr/ab逆转录病毒介导的慢性粒细胞白血病样小鼠模型的首次建立含bcr/abl癌基因的逆转录病毒Mig210载体经Phoenix-Ampo细...
【文章来源】：重庆医科大学重庆市
【文章页数】：56 页
【学位级别】：硕士
【部分图文】：
重组质粒酶切产物电泳图
图1-3 5-FU处理后骨髓中原始细胞占有核细胞比ig1-3 Archaeocyte of BM cell compare; with nucleated cell after 5-FU treat病毒上清感染骨髓细胞的影响感染24h、48天后均可观察到未使用FN组的骨髓细胞漂浮于整个FN组的活细胞附着于瓶底,细胞状态较好,台盼蓝染色显示使用的活细胞多20%～30%（附图1-5）。小鼠存活状态观察线照射的受体小鼠次日出现畏冷、恐慌、相拥缩成一团，1 周之逐渐消瘦、活动力明显减低，这些症状在 2 周后逐渐改善。A 时皮肤开始出现出血点，第四个月后相继死去。解剖发现肝、其他组小鼠中途未见死亡。所有经 γ 射线照射的受体小鼠，2~3
2 7 . 3 7 ± 3 . 4 4 8 6 . 0 7 ± 4 . 6 7 1 3 . 9 3 ± 4 . 6 7 1 织病理检查周时脾脏开始增大，晚期有大量白血病细胞、C、D组的肝脾在前4周内无差异，由于正常组的脾缩小约0.02g；B,C,D组肝组织附图1-11）。A组小鼠在移植12周后相继发移植小鼠的bcr/abl融合基因CR检测A组受体鼠骨髓细胞和脾细胞时肝组织有bcr/abl融合基因，DNA测序证全符合，其它组小鼠未检测出bcr/abl融合
本文编号：2898499
【文章来源】：重庆医科大学重庆市
【文章页数】：56 页
【学位级别】：硕士
【部分图文】：
重组质粒酶切产物电泳图
图1-3 5-FU处理后骨髓中原始细胞占有核细胞比ig1-3 Archaeocyte of BM cell compare; with nucleated cell after 5-FU treat病毒上清感染骨髓细胞的影响感染24h、48天后均可观察到未使用FN组的骨髓细胞漂浮于整个FN组的活细胞附着于瓶底,细胞状态较好,台盼蓝染色显示使用的活细胞多20%～30%（附图1-5）。小鼠存活状态观察线照射的受体小鼠次日出现畏冷、恐慌、相拥缩成一团，1 周之逐渐消瘦、活动力明显减低，这些症状在 2 周后逐渐改善。A 时皮肤开始出现出血点，第四个月后相继死去。解剖发现肝、其他组小鼠中途未见死亡。所有经 γ 射线照射的受体小鼠，2~3
2 7 . 3 7 ± 3 . 4 4 8 6 . 0 7 ± 4 . 6 7 1 3 . 9 3 ± 4 . 6 7 1 织病理检查周时脾脏开始增大，晚期有大量白血病细胞、C、D组的肝脾在前4周内无差异，由于正常组的脾缩小约0.02g；B,C,D组肝组织附图1-11）。A组小鼠在移植12周后相继发移植小鼠的bcr/abl融合基因CR检测A组受体鼠骨髓细胞和脾细胞时肝组织有bcr/abl融合基因，DNA测序证全符合，其它组小鼠未检测出bcr/abl融合
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