协同共刺激分子CD28参与小鼠胚胎着床过程
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【摘要】:目的: 胚胎植入是一个复杂的过程,需要活性囊胚和接受态子宫之间复杂的相互作用。胚胎着床过程中,母体免疫系统发生一系列复杂而精细的变化以适应胚胎植入。围着床期的子宫内膜,在复杂的神经-内分泌-免疫调节下,形成有利于胚胎着床的免疫微环境。构成免疫微环境的物质主要为免疫细胞和炎症相关因子。T细胞是一种存在于母胎界面的重要免疫细胞。TCR/CD3复合物介导的第一信号和协同共刺激分子CD28提供的第二信号在T细胞分化成为效应细胞的过程中是必不可少的。在我们课题组前期芯片结果中发现,CD28在小鼠着床窗口期的着床点和着床旁的表达具有明显差异,我们推测这种差异可能与胚胎着床有关。由于CD28在小鼠的早孕期的表达和功能仍不清楚,为更好地了解胚胎植入过程中的免疫调节作用,,本研究检测了CD28在小鼠早孕期子宫内膜的时空表达情况,并探讨其在胚胎植入中的功能。 方法: (1)运用实时荧光定量PCR,免疫印迹,原位杂交和免疫组织化学技术检测CD28mRNA和蛋白在真孕和假孕小鼠子宫内膜中的表达模式。为了检测T细胞活化的第一信号CD3是否与第二信号CD28同时存在,我们运用免疫组织化学技术检测CD3蛋白在真孕小鼠子宫中的表达部位。 (2)宫角注射CD28反义寡核苷酸,利用尾静脉注射台盼蓝区分着床点和着床旁,从而计数胚胎植入位点数目。 结果: (1)妊娠早期真孕和假孕小鼠子宫内膜中,CD28的表达模式具有时空特性。CD28mRNA和蛋白在真孕D5的表达高于其它天,假孕无明显表达高峰,且妊娠第5天着床点的表达低于着床旁。CD3蛋白在真孕小鼠子宫中的表达趋势与CD28相似。 (2)宫角注射CD28反义寡核苷酸会导致植入位点的减少。 结论: 实验结果表明,在早期真孕和假孕小鼠子宫内膜中,CD28的表达模式具有时空特性。CD28在小鼠子宫内膜植入窗期的高水平表达,表明CD28可能参与了胚胎着床。我们推测CD28可能是通过产生协同共刺激信号来参与这个过程的,然而其具体机制仍需要进一步研究。
【关键词】:CD28 胚胎着床 协同共刺激信号
【学位授予单位】:重庆医科大学
【学位级别】:硕士
【学位授予年份】:2014
【分类号】:R321.3
【目录】:
- 符号说明5-7
- 摘要7-9
- ABSTRACT9-12
- 前言12-13
- 1 材料和方法13-19
- 2 结果19-29
- 3 讨论29-31
- 全文总结与展望31-32
- 参考文献32-35
- 文献综述35-41
- 参考文献38-41
- 致谢41-42
- 攻读硕士学位期间发表的学术论文42-43
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