携载增强型绿色荧光蛋白基因慢病毒标记小鼠脐带间充质干细胞示踪方法

发布时间：2020-12-12 23:09

　　目的探讨慢病毒载体介导增强型绿色荧光蛋白(enhanced green fluorecent protein,eGFP)转染小鼠脐带间充质干细胞(umbilical cord mesenchymal stem cells,UCMSCs)的最佳感染复数(multiplicity of infection,MOI)。方法通过组织贴壁法得到mUCMSCs;用生长增殖曲线、成骨、成软骨及成脂分化进行鉴定;以MOI为50、100、150、200携载eGFP的慢病毒载体介导转染mUCMSC,倒置显微镜下观察荧光表达,确定荧光表达率最高的MOI组。结果 eGFP慢病毒以MOI=150转染mUCMSC,效率较高,可直接用于体内示踪。结论用小鼠脐带可以分离出mUCMSCs,MOI=150时携载eGFP的慢病毒传染mUCMSCs效果最好。 

【文章来源】：延安大学学报(医学科学版). 2019年03期

【文章页数】：4 页

【文章目录】：
1 材料与方法
    1.1 材料
    1.2 mUCMSCs的分离培养
    1.3 mUCMSCs增殖曲线绘制
    1.4 mUCMSCs分化潜能检测
    1.5 mUCMSCs的标记
2 结果
    2.1 mUCMSCs的分离及培养
    2.2 mUCMSCs增殖曲线
    2.3 mUCMSC的成软骨、成脂、成骨三向分化
    2.4 慢病毒载体介导GFP基因转染mUCMSCs的MOI筛选
3 讨论


【参考文献】：
期刊论文
[1]小鼠脐带间充质干细胞的体外诱导分化[J]. 朱慧,叶莉,何洁,余璞,王金祥,王强,赵晶,庞荣清,白杰英.  中国实验动物学报. 2015(06)



本文编号：2913437