新生小鼠卵巢移植片培育MⅡ卵制备胚胎干细胞

发布时间：2017-04-07 22:06

  本文关键词：新生小鼠卵巢移植片培育MⅡ卵制备胚胎干细胞，由笔耕文化传播整理发布。

【摘要】：目的： 1.1.建立从原始卵泡培育具有良好发育潜能的MⅡ卵的组织工程技术方案； 2.2.从原始卵泡培育MⅡ卵制备胚胎干细胞； 3.3.为人卵巢工程建立实验基础。 方法： 新生0.5d小鼠卵巢切片异体移植到成年母鼠肾被膜下，21天后对宿主腹腔注射PMSG10IU/只，给药44h后用机械穿刺法收获卵巢移植物中的卵冠丘复合体，再通过体外成熟培养16h，得到的IVM-MⅡ卵进行体外受精，受精卵发育至囊胚时从内细胞团制备小鼠胚胎干细胞，并对建立的干细胞系进行鉴定。 结果： 1.从移植切片卵巢所获COCs在体外成熟后得到IVM-MⅡ卵，可受精并发育至囊胚分离出ICM，成功制备1批胚胎干细胞并传至P4代，，并通过畸胎瘤、碱性磷酸酶染色、SSEA-1和嵌合体实验对建立的胚胎干细胞完成鉴定。 结论： 本实验报道证实了新生鼠卵巢（卵泡募集前卵巢）切片异体移植联合体外成熟培养获得的成熟卵（MⅡ卵）具有很好的发育潜能，可供制备胚胎干细胞。为人废弃卵巢培育MⅡ卵并制备胚胎干细胞建立了实验模型。
【关键词】：卵巢 卵母细胞 体外成熟 胚胎干细胞 嵌合体
【学位授予单位】：福建医科大学
【学位级别】：硕士
【学位授予年份】：2014
【分类号】：R737.31;R-332
【目录】：

• 英文缩略词表5-6
• 中文摘要6-7
• Abstract7-9
• 前言9-13
• 实验材料与方法13-27
• 一、 实验动物13-27
• 实验方法27-48
• 实验结果48-60
• 讨论60-64
• 结论64-65
• 参考文献65-71
• 致谢71-72
• 综述72-79
• 参考文献77-79

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本文编号：291406