E.coli Era及其相互作用蛋白的结构与功能研究

发布时间：2020-12-16 12:00

　　Era，即大肠杆菌Ras样蛋白（E．coli Ras-like protein Era），基因命名为era。Era是在原核和真核生物以及植物中普遍存在的G蛋白，是一个结构上既具有GTP结合结构域又有RNA结合结构域、不同于Ras的独特的新的G蛋白亚家族。大肠杆菌Era为细菌生长繁殖所必需并参与细菌分裂周期的调控。根据本课题组筛选Era结合蛋白时获得的噬菌体中的插段包含大肠杆菌的yggG speB基因，本研究分析了Era与YggG SpeB的相互作用。实验结果表明：在细菌内可能存在Era和SpeB的同源二聚体。YggG的过表达阻碍细菌生长，并使细菌逐渐趋向死亡。在荧光显微镜下细菌形态的变化，以及DAPI染色和透射电子显微镜观察，YggG的表达与Era突变（使Era功能降低时）对细菌分裂的影响有类似之处，即细菌DNA合成，子代DNA分离后；分裂停滞，形成细菌繁殖受阻时，2-4倍体的出现。YggG敲除的菌株呈现绿色。生物信息学的分析提示：YggG可能是一种金属蛋白酶，属于Peptidase M48家族， 臼·罕医夭念傅士行住公式含有HE－基序。The... 

【文章来源】：中国人民解放军空军军医大学陕西省 211工程院校

【文章页数】：71 页

【学位级别】：博士

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英文摘要
大肠杆菌Era的结构与功能
    一、 Era的结构和分布
    二、 Era的功能
    三、 Era研究的意义
    四、 结束语
    参考文献
实验一 大肠杆菌era speB yggG生物信息学分析
    一、 大肠杆菌era speB yggG的基本特征
    二、 大肠杆菌era speB yggG基因芯片表达差异的数据
    三、 大肠杆菌era speB yggG保守结构域的分析
    四、 大肠杆菌yggG的同源序列
    五、 有关大肠杆菌speB yggG研究的文献
    六、 讨论
实验二 细菌双杂交系统pT25与pT18载体的构建
    一、 实验材料
    二、 实验方法
    三、 实验结果
    四、 讨论
实验三 Era SpeB YggG ZggG YggG2蛋白之间的相互作用
    一、 实验材料
    二、 实验方法
    三、 实验结果
    四、 讨论
实验四 E．coli Era SpeB YggG在DH5αTAP106 DHM中的诱导表达及对细菌生长的影响
    一、 实验材料
    二、 实验方法
    三、 实验结果
    四、 讨论
实验五 E．coli era与yggG酵母双杂交表达载体的构建
    一、 实验材料
    二、 实验方法
    三、 实验结果
    四、 讨论
实验六 大肠杆菌Era YggG温度诱导型GFP即融合表达载体的构建
    一、 实验材料
    二、 实验方法
    三、 实验结果
    四、 讨论
实验七 大肠杆菌DY330 DY331 yggG基因敲除菌株的建立
    一、 实验材料
    二、 实验方法
    三、 实验结果
    四、 讨论
全文总结与讨论
致谢


【参考文献】：
期刊论文
[1]大肠杆菌中高表达重组Era可溶性蛋白的纯化及其生化特性[J]. 陈苏民,DonaldL.Court.  生物化学杂志. 1992(01)



本文编号：2920106