酵母双杂交筛选PA28γ相互作用蛋白

发布时间：2017-04-08 05:19

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【摘要】：目的通过酵母双杂交筛选与蛋白酶体激活因子3(PA28γ)相互作用的肝细胞蛋白,为研究其在肝癌的发生发展中的作用机制提供新依据。方法通过酵母双杂交技术,构建PGBKT7-PA28γ蛋白酶体激活因子酵母双杂交诱饵载体,以PA28γ为诱饵,在人类肝细胞cDNA文库中筛选与之相互作用的蛋白,并将部分阳性基因构建表达载体后与PA28γ共转染于AGS细胞进行初步验证。结果筛选出32个阳性克隆,其中有5个与肝癌细胞周期及凋亡密切相关,如ZPR9。将PWPI-PA28γ和Pcmv-myc-ZPR9共转染AGS细胞,检测发现PA28γ含量与ZPR9负相关。结论成功筛选到一些与肝癌细胞周期及凋亡相关的蛋白,为研究其机制提供了良好的线索和基础。
【作者单位】： 南方医科大学生物技术学院;
【关键词】： PAγ 蛋白酶体 酵母双杂交
【基金】：国家863课题资助项目(2012AA020205)
【分类号】：Q78
【正文快照】： PA28γ(又称REGγ、11Sγ、PSME3)是一种蛋白酶体调节因子,它能结合到20S蛋白酶体的外环并促进小肽的降解,这个过程并不依赖蛋白的泛素化,也不依赖腺嘌呤核苷三磷酸[1]。本实验旨在通过酵母双杂交筛选与PA28γ相互作用的肝细胞蛋白,为研究其对肝癌细胞周期及凋亡的影响提供线

【共引文献】

中国期刊全文数据库 前1条

1 覃晴;郭福春;罗顺涛;李晓玉;刘晓柯;王永生;;REGγ促进肺癌细胞的恶性生物学行为[J];四川大学学报(医学版);2014年02期

中国博士学位论文全文数据库 前7条

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2 李磊;REGγ缺陷通过CK1δ-Mdm2-p53通路导致小鼠发生早衰[D];华东师范大学;2013年

3 王露;SUMO化修饰影响REGγ功能的分子机制及REGγ的生物学功能研究[D];华东师范大学;2013年

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5 贾彩凤;REGγ调控脂质代谢的研究[D];华东师范大学;2014年

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7 李平;人源2OS蛋白酶体激活因子REGγ结构与功能研究[D];南开大学;2013年

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1 陈小慧;费菲;向海英;韩成贵;程玉琴;;用酵母双杂交筛选与南瓜蚜传黄化病毒MP互作的寄主因子[J];植物保护学报;2010年04期

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本文编号：292154