程序性细胞死亡因子4基因在体干扰大鼠模型的构建

发布时间：2020-12-20 23:53

　　目的构建大鼠程序性细胞死亡因子4（programmed cell death 4,Pdcd4）基因在体干扰模型,为进一步研究该基因的功能提供条件。方法通过给予抗原诱导肺部炎症模型大鼠,鼻腔滴入Pdcd4的干扰质粒,以下调其体内Pdcd4的表达。收集大鼠支气管肺泡灌洗液细胞,提取总RNA,RT-qPCR检测Pdcd4基因mRNA的表达水平。结果在模型大鼠鼻腔滴入Pdcd4的干扰质粒,大鼠支气管肺泡灌洗液细胞中的Pdcd4的mRNA表达明显下调。结论成功构建了Pdcd4基因的在体干扰大鼠模型,为进一步研究Pdcd4基因的功能和作用机制奠定基础。 

【文章来源】：西安交通大学学报(医学版). 2019年05期 北大核心

【文章页数】：5 页

【部分图文】：

图１大鼠在体干扰流程示意图

。１．７统计学分析所有计量资料数据以珔ｘ±ｓ表示，采用Ｇｒａｐｈｐａｄｐｒｉｓｍ５统计软件分析，多组均数间比较采用Ｏｎｅ－ｗａｙＡＮＯＶＡ。Ｐ＜０．０５为差异有统计学意义。２结果２．１肺组织切片的ＨＥ染色与病理学计数结果与对照组相比，ＡＩＰＩ模型组、无关质粒组及Ｐｄｃｄ４干扰组大鼠的ＨＥ染色显示，肺组织切片中可见支气管周围及肺泡中有大量炎症细胞浸润。对支气管周围渗出的细胞进行统计学分析发现，后３组的病理学计数值均较对照组明显升高（图２），表明成功诱导肺部炎症模型。但是，Ｐｄｃｄ４干扰组与无关质粒组的病理学计数没有差异，提示Ｐｄｃｄ４的在体干扰对于肺组织炎症渗出没有明显影响。２．２ＢＡＬＦ细胞中Ｐｄｃｄ４的ｍＲＮＡ表达变化ＲＴ－ｑＰＣＲ检测结果显示，Ｐｄｃｄ４ｓｈＲＮＡ干扰组大鼠ＢＡＬＦ细胞中Ｐｄｃｄ４的ｍＲＮＡ表达明显下调（图３），提示大鼠Ｐｄｃｄ４基因干扰模型的构建是成功的。图２ＡＩＰＩ大鼠肺组织的病理学改变Ｆｉｇ．２ＰａｔｈｏｌｏｇｉｃａｌｃｈａｎｇｅｓｏｆＡＩＰＩｒａｔｌｕｎｇｔｉｓｓｕｅｓＡ～Ｄ：ＨＥ染色（×２００）；Ｅ：肺组织病理计分的统计学分析（珔ｘ±ｓ，ｎ＝８），＊Ｐ＜０．０５。图３各组大鼠ＢＡＬＦ细胞中Ｐｄｃｄ４ｍＲＮＡ的表达变化Ｆｉｇ．３Ｐｄｃｄ４ｍＲＮＡｅｘｐｒｅｓｓｉｏｎｏｆＢＡＬＦｃｅｌｌｓｏｆｒａｔｓｉｎｇｒｏｕｐｓｎ＝８，珔ｘ±ｓ。＊Ｐ＜０．０５。２．３ＢＡＬＦ细胞计数结果分别计数各组ＢＡＬＦ中总细胞、淋巴细胞、巨噬细胞及嗜酸性粒细胞数，结果显示

显示，肺组织切片中可见支气管周围及肺泡中有大量炎症细胞浸润。对支气管周围渗出的细胞进行统计学分析发现，后３组的病理学计数值均较对照组明显升高（图２），表明成功诱导肺部炎症模型。但是，Ｐｄｃｄ４干扰组与无关质粒组的病理学计数没有差异，提示Ｐｄｃｄ４的在体干扰对于肺组织炎症渗出没有明显影响。２．２ＢＡＬＦ细胞中Ｐｄｃｄ４的ｍＲＮＡ表达变化ＲＴ－ｑＰＣＲ检测结果显示，Ｐｄｃｄ４ｓｈＲＮＡ干扰组大鼠ＢＡＬＦ细胞中Ｐｄｃｄ４的ｍＲＮＡ表达明显下调（图３），提示大鼠Ｐｄｃｄ４基因干扰模型的构建是成功的。图２ＡＩＰＩ大鼠肺组织的病理学改变Ｆｉｇ．２ＰａｔｈｏｌｏｇｉｃａｌｃｈａｎｇｅｓｏｆＡＩＰＩｒａｔｌｕｎｇｔｉｓｓｕｅｓＡ～Ｄ：ＨＥ染色（×２００）；Ｅ：肺组织病理计分的统计学分析（珔ｘ±ｓ，ｎ＝８），＊Ｐ＜０．０５。图３各组大鼠ＢＡＬＦ细胞中Ｐｄｃｄ４ｍＲＮＡ的表达变化Ｆｉｇ．３Ｐｄｃｄ４ｍＲＮＡｅｘｐｒｅｓｓｉｏｎｏｆＢＡＬＦｃｅｌｌｓｏｆｒａｔｓｉｎｇｒｏｕｐｓｎ＝８，珔ｘ±ｓ。＊Ｐ＜０．０５。２．３ＢＡＬＦ细胞计数结果分别计数各组ＢＡＬＦ中总细胞、淋巴细胞、巨噬细胞及嗜酸性粒细胞数，结果显示，Ｐｄｃｄ４干扰组与无关质粒组的嗜酸性粒细胞数有明显差异，表明Ｐｄｃｄ４干扰可以减少肺泡嗜酸性粒细胞的浸润。但两组的总细胞、淋巴细胞、巨噬细胞等计数没有明显差异（图４）。２．４血清中一氧化氮、总ＩｇＥ、ＯＶＡ特异性ＩｇＧ的检测结果Ｐｄｃｄ４在体干扰后，大鼠血清一氧化氮、总ＩｇＥ、ＯＶＡ特异性ＩｇＧ等指


本文编号：2928795