以角朊细胞作靶细胞进行基因转染、基因表达的实验研究

发布时间：2021-01-07 02:18

　　基因治疗研究已成为近十年来医学生物学界的一项热点研究课题。虽然已取得很大进展，但仍存在一些问题亟待解决，其中靶细胞的选择便是影响基因治疗效果的关键问题之一。 随着对皮肤角朊细胞研究的深入和发展，人们已发现角朊细胞具有许多未曾被认识到的功能和活性，它除了符合基因治疗中靶细胞的基本条件外，还具有许多其它类型靶细胞所不具备的优点，如取材方便，容易获得，易于回植，便于观察和调控基因表达情况及不良反应，且角朊细胞本身就能分泌一些细胞因子和生长因子，因而表皮被认为是一种理想的靶器官，以角朊细胞作为靶细胞进行基因治疗的设想也随之诞生，并受到了生物学界的重视，这一技术被称为角朊细胞基因治疗（Keratinocyte gene therapy）。 为研究角朊细胞基因转染的可行性，本实验拟进行①正常人皮肤角朊细胞的分离、原代培养、传代培养，观察角朊细胞的生长特性及代谢活性，为基因转染做好靶细胞准备；②β-半乳糖苷酶（β-gal）、绿色荧光蛋白（EGFP）基因转染角朊细胞的瞬时表达检测；③人白细胞介素2（IL-2）基因转染角朊细胞的稳定表达检测。 实验中用胰酶消化法分离正常人皮肤角朊细胞，... 

【文章来源】：中国人民解放军空军军医大学陕西省 211工程院校

【文章页数】：72 页

【学位级别】：博士

【图文】：

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第四军医大学博士学位论文第二部分p一gal、EGFP基因转染角阮细施的瞬时表达检浏一材朴和方法--().实脸材料1.质拉、菌种:pSLxCMv.pgal质拉(图4)及HB101由本校病理教研室朱明华教授惠时，;该质粒在载体psLxCMv的B田mHI和众oI之间插入一段3，3kb的p·gal序列;pEGF-PN3质粒(图5)由本室赵利军博士惠时(aontechLaboratones，nIc产品)，该质粒在细胞内表达后，可发出绿色荧光.


本文编号：2961703