人骨髓间充质干细胞对树突状细胞免疫功能的影响

发布时间：2021-01-07 05:38

　　最近研究表明MSC能抑制细胞或有丝分裂原引起的T细胞增殖，虽然MSC对T细胞具有直接的负调控能力，但MSC对免疫反应的始动者DC是否也具有免疫调控作用国内外均未见报道。本课题就此展开深入探讨。 首先，从人骨髓中分离培养间充质干细胞（mesenchymal stem cell，MSC），并从形态、表型和分化功能三个方面进行鉴定。通过混合淋巴细胞反应和淋巴母细胞转化实验证明MSC可抑制异体T细胞的增殖，且随MSC的量的增加，这种抑制能力增强。其次，利用免疫磁珠法从外周血分离CD14+单核细胞，GM-CSF+IL-4+TNF-α诱导树突状细胞（dendritic cell，DC），同样从形态、表型和功能三个方面鉴定。最后，探讨MSC对DC生物学特性的影响，结果表明MSC抑制DC的发育、成熟和功能。在DC的诱导体系中，MSC抑制CD14+单核细胞向DC的分化。细胞间接触和可溶性分子均参与MSC对DC发育的负调控，且细胞间接触发挥更大作用。进一步，利用中和实验探讨对DC生成起重要作用的IL-6和M-CSF在有MSC参与的共培养体系中的作用。结果表明，虽然MSC分泌IL-6和M-CSF，但中... 

【文章来源】：中国人民解放军军事科学院北京市

【文章页数】：90 页

【学位级别】：博士

【部分图文】：

MSC细胞化学染色结果

MSC的免疫组化特征为纤维连接蛋白(Fibroneetin)、层粘连蛋白(Laminin)、波形蛋白(Vimentin)为阳性，vWF、平滑肌动蛋白(SmoothMuscleAetin)、结蛋白(Desmin)为阴性，见图1一8。二、MSC的多向分化特性1.成脂肪诱导在含10%FBS高糖DMEM中，加入地塞米松1pM、消炎痛加0pM、IBMXo.smM、胰岛素10pg/ml的成脂肪诱导体系中培养3d，细胞由成纤维细胞样逐渐收缩变短，成为立方形或多角形;连续培养7d，镜下可见细胞内有微小脂滴出现，随着时间的延长，脂滴逐渐增大融合，培养Zw时，可见融合成团的脂滴充满整个细胞，诱导Zw后用油红O染色

性磷酸酶染色，呈强阳性反应，达到95%以上。成骨诱导Zw，细胞基质中就可见钙沉积，逐渐出现矿化物，至4w时己形成钙化结节，vonKossa染色可将骨结节中沉积的钙染成黑色(图1一10)。成骨细胞特异性的表达OsteoPontin，Msc诱导10d，提取总RNA进行Rl七pCR，结果显示，OsteoPoniin可被明显地检测到，而在未经诱导的细胞中则没有这种特异性产物表达(图1一12)。图1一10Ms藻奔再而丽葬丽{正常Msc为梭形(A)，诱导lw，细胞形态改变(B)，原位染色显示碱性磷酸酶阳性(C)

【参考文献】：
硕士论文
[1]脐带间充质干细胞治疗狼疮性肾炎的临床疗效研究[D]. 周欣谕.福建医科大学 2016



本文编号：2962014