激活素受体II结合蛋白基因的克

发布时间：2021-01-12 02:20

　　为了详细探讨激活素的信号传递机制,以激活素受体ⅡA的细胞内段作饵用酵母双杂交方法筛选得到一个新的PDZ蛋白,命名为ARIP2,以ARIP2 cDNA为探针筛选鼠脑cDNA文库,得到ARIP2的全长cDNA序列及另一个新的PDZ蛋白,因其缺乏ARIP2的C末端序列,命名为ARIP2-short,通过ELISA、哺乳动物双杂交及免疫沉淀鉴定二者均可通过其N末端的PDZ功能区与ActRⅡA的C末端结合; ARIP2在CHO-K1细胞中的超表达可促进ActRⅡA的内化,而ARIP2-short则减少其内化; ARIP2可抑制FSH启动子的活性,并减少FSH mRNA的表达,而ARIP2-short则可增强FSH的活性并增加FSH mRNA的表达。为了研究激活素对胎鼠纹状体多巴胺能神经的诱导作用,我们取E14胎鼠纹状体,用ActivinA及bFGF刺激,用RT-PCR及免疫荧光染色对多巴胺能神经相关因子进行检测,结果显示ActivinA和bFGF可协同作用诱导纹状体干细胞向多巴胺能神经进行分化。 

【文章来源】：吉林大学吉林省 211工程院校 985工程院校 教育部直属院校

【文章页数】：71 页

【学位级别】：博士

【文章目录】：
提要
英文缩写词表
前言
文献回顾
    一、Activin的结构
    二、Activin的功能
    三、激活素的信号传递机制
    四、PDZ domain和细胞膜蛋白质网络的构筑
    五、Activin在神经干细胞诱导中的作用
    六、本文的立题依据及创新点
材料与方法
    一、材料
    二、方法
        （一） 酵母双杂交筛选Activin受体ⅡA结合蛋白
2cDNA和ARIP₂-short cDNA的克隆">        （二） 鼠ARIP₂cDNA和ARIP₂-short cDNA的克隆
        （三） 鼠ARIPs基因组的克隆
        （四） 将外源基因导入培养细胞的方法
结果分析
2及ARIP₂-short的克隆">    一、ARIP₂及ARIP₂-short的克隆
    二、ARIPs部分基因组的克隆
    三、ARIPs启动子的分析
2转录起始点的确定">    四、ARIP₂转录起始点的确定
2和ARIP₂-short均可与ActRⅡA结合">    五、ARIP₂和ARIP₂-short均可与ActRⅡA结合
2和ARIP₂-short通过PDZ domain与ActRⅡAC末端相互作用">    六、ARIP₂和ARIP₂-short通过PDZ domain与ActRⅡAC末端相互作用
2也可与ActRⅡA 相互作用">    七、内源性ARIP₂也可与ActRⅡA 相互作用
2可形成同源二聚体">    八、ARIP₂可形成同源二聚体
2mRNA 广泛存在于鼠组织中">    九、ARIP₂mRNA 广泛存在于鼠组织中
    十、ARIPs 在鼠组织中的分布
2及ARIP₂-short对ActivinA 诱导的转录的影响">    十一、ARIP₂及ARIP₂-short对ActivinA 诱导的转录的影响
2和ARIP₂-short可调节受体ⅡA 的内化">    十二、ARIP₂和ARIP₂-short可调节受体ⅡA 的内化
2和ARIP₂-short对FSH 启动子活性的影响">    十三、ARIP₂和ARIP₂-short对FSH 启动子活性的影响
2和ARIP₂-short对LβT2 细胞中 FSHβ表达的影响">    十四、ARIP₂和ARIP₂-short对LβT2 细胞中 FSHβ表达的影响
    十五、Activin对LβT2 细胞中FSHβ及insulin表达的影响
    十六、ActivinA对E14 胎鼠大脑干细胞中ARIPs及insulin表达的影响
    十七、激活素A对E14小鼠纹状体多巴胺能神经相关因子表达的影响
讨论
小结
参考文献
中文摘要
    一、Activin受体结合蛋白的克隆及鉴定
    二、ActivinA和bFGF对胎鼠纹状体多巴胺能神经的协同诱导
    三、ActivinA诱导胎鼠干细胞向insulin分泌细胞分化
英文摘要
个人简历
攻读博士学位期间发表文章



本文编号：2971943