阻断巨噬细胞炎性蛋白-1a对炎症小鼠子宫巨噬细胞及干扰素-γ的影响
本文关键词：阻断巨噬细胞炎性蛋白-1a对炎症小鼠子宫巨噬细胞及干扰素-γ的影响，由笔耕文化传播整理发布。
【摘要】：目的：以LPS诱导的炎症小鼠为模型，通过阻断MIP-1α，，研究MIP-1α在母体子宫炎症反应时，对子宫巨噬细胞及其表面受体CD14以及细胞因子IFN-γ产生的影响，从而探讨MIP-1α在小鼠子宫局部免疫反应中的作用。 方法：将75只昆明种雌性小鼠随机分为三组，每组25只，分别为对照组（A组）、模型组（B组）以及实验组（C组）。A组第一天上午9:00尾静脉注射PBS0.2ml，第二天同一时间注射PBS50μl；在同样时间，B组首次尾静脉注射LPS0.2ml，第二次注射PBS50μl；C组首次注射LPS0.2ml，第二次注射MIP-1α多克隆抗体50μl。三组小鼠分别于末次注射后的五个时间点1h、3h、6h、12h、24h处死，剖开腹腔取出其子宫，A组的五个时间点分别标记为A1、A3、A6、A12、A24；另外B和C两组做与其类似的标记。各组小鼠子宫分别做石蜡切片和免疫组化方法检测CD14巨噬细胞的数量和分布变化情况，以及EILSA方法检测阻断后的MIP-1α和IFN-γ的表达量。 结果：(1) A组中CD14+巨噬细胞主要分布于子宫内膜和外膜，肌层很少；B组中CD14+巨噬细胞数量明显增多且各部分组织中分布均匀；C组子宫外膜CD14+巨噬细胞数量则明显多于子宫内膜和肌层。(2)B组与A组相比，小鼠子宫CD14+巨噬细胞的数量、CD14以及IFN-γ的表达量均极显著升高（P0.01）。(3) C组与A组相比，IFN-γ的表达量1h、3h、6h时与A组无明显差异，12h和24h时极显著升高（P㩳0.01）。小鼠子宫内膜与肌层中CD14+巨噬细胞的数量、CD14的表达量1h、3h、6h与A组基本一致，12h、24h极显著升高（P㩳0.01），子宫外膜巨噬细胞数量及CD14表达量极显著高于A组（P0.01）。(4)C组与B组相比，IFN-γ的表达量极显著降低（P0.01）。小鼠子宫内膜与肌层中CD14+巨噬细胞的数量、CD14的表达量极显著降低（P0.01）；1h、3h、6h时子宫外膜CD14+巨噬细胞数量和CD14表达量均极显著降低（P0.01），12h和24h则与B组无显著差异。 结论：(1)在LPS诱导的小鼠子宫炎症反应中，MIP-1α的高表达可以引起巨噬细胞数量增多，CD14和IFN-γ的表达量显著升高。(2)通过阻断MIP-1α，可以减轻小鼠子宫内部的炎症反应，减少巨噬细胞的数量，降低CD14及IFN-γ的表达量。(3) MIP-1α对于趋化小鼠子宫巨噬细胞起着重要作用，阻断MIP-1α可以抑制巨噬细胞从子宫系膜区和外膜向内膜的迁移，从而在炎症反应中发挥作用。
【关键词】：小鼠 子宫 巨噬细胞 LPS MIP-1α IFN-γ CD14
【学位授予单位】：河南师范大学
【学位级别】：硕士
【学位授予年份】：2014
【分类号】：R363
【目录】：
- 摘要4-6
- ABSTRACT6-13
- 1 前言13-29
- 1.1 妊娠与母胎免疫耐受13-16
- 1.1.1 妊娠13
- 1.1.2 免疫耐受13-15
- 1.1.3 母胎免疫耐受15-16
- 1.2 脂多糖（LPS）与流产16-18
- 1.2.1 脂多糖（LPS）16-17
- 1.2.2 流产17-18
- 1.3 参与母胎界面调节的免疫细胞18-25
- 1.3.1 巨噬细胞18-22
- 1.3.2 其他重要免疫细胞22-25
- 1.4 调节母胎界面的细胞因子25-29
- 1.4.1 趋化因子和巨噬细胞炎性蛋白-1α（MIP-1α）25-26
- 1.4.2 干扰素-γ（IFN-γ）26-29
- 2 材料与方法29-37
- 2.1 材料29-30
- 2.1.1 实验动物29
- 2.1.2 主要实验试剂和配制29-30
- 2.1.3 实验仪器30
- 2.2 实验内容30-37
- 2.2.1 实验分组30
- 2.2.2 实验取材30
- 2.2.3 实验材料的制备30-31
- 2.2.4 实验方法31-35
- 2.2.5 数据统计35-37
- 3 实验结果与分析37-61
- 3.1 阻断 MIP-1α对小鼠子宫 CD1~(4+)巨噬细胞的影响37-45
- 3.1.1 阻断 MIP-1α对小鼠子宫内膜 CD1~(4+)巨噬细胞分布的影响37-39
- 3.1.2 阻断 MIP-1α对小鼠子宫肌层 CD1~(4+)巨噬细胞分布的影响39-42
- 3.1.3 阻断 MIP-1α对小鼠子宫外膜 CD1~(4+)巨噬细胞分布的影响42-45
- 3.2 阻断 MIP-1α对小鼠子宫 CD14 表达的影响45-53
- 3.2.1 阻断 MIP-1α对小鼠子宫内膜 CD14 表达的影响45-48
- 3.2.2 阻断 MIP-1α对小鼠子宫肌层 CD14 表达的影响48-51
- 3.2.3 阻断 MIP-1α对小鼠子宫外膜 CD14 表达的影响51-53
- 3.3 阻断 MIP-1α对小鼠子宫 MIP-1α表达的影响53-56
- 3.4 阻断 MIP-1α对小鼠子宫 IFN-γ表达的影响56-61
- 4 讨论61-67
- 4.1 本论文研究的意义及出发点61-62
- 4.2 LPS 诱导炎症过程中巨噬细胞、CD14、MIP-1α、IFN-γ的关系62
- 4.3 阻断 MIP-1α对小鼠子宫 CD1~(4+)巨噬细胞以及 CD14 表达的影响62-63
- 4.4 阻断 MIP-1α对小鼠子宫内 MIP-1α和 IFN-γ表达的影响63-64
- 4.5 阻断 MIP-1α后小鼠子宫炎性细胞与炎性因子数量和表达的变化64-67
- 5 结论67-69
- 参考文献69-77
- 图版77-83
- 致谢83-84
- 攻读学位期间发表的学术论文目录84-85
【参考文献】
中国期刊全文数据库 前10条
1 谢金文;万勇;余为一;;CD14分子的研究进展[J];安徽农学通报;2006年04期
2 刘兴,冯文莉,康格非;脂多糖受体的研究进展[J];国外医学.临床生物化学与检验学分册;2001年03期
3 侯倩;NK细胞及Th细胞因子在母胎界面的免疫调控作用[J];国外医学.妇产科学分册;1999年06期
4 闫玉河,张改平,张云汉;CD14抗原的结构与功能[J];国外医学(免疫学分册);1999年04期
5 肖畅;CD14：细胞表面受体及分化标志[J];国外医学(免疫学分册);1994年04期
6 闫凤亭,李大金;母胎界面免疫微环境及其功能[J];国外医学.妇幼保健分册;2000年03期
7 赵丽丽,王俐 ,曲迅,孔北华;妊娠期子宫NK细胞功能的研究进展[J];现代免疫学;2005年01期
8 周世文,徐传福;多糖的免疫药理作用[J];中国生化药物杂志;1994年02期
9 周子清;;革兰氏阴性细菌脂多糖的流产作用[J];生殖与避孕;1981年02期
10 白洁,荫俊;CD14生物学特性[J];国外医学(生理、病理科学与临床分册);2000年02期
中国博士学位论文全文数据库 前1条
1 赵延涛;LPS致流产作用及保胎中药的调控效应研究[D];河北农业大学;2011年
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本文编号：302717
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