Scleraxis联合碱性成纤维细胞生长因子体外促进人羊膜间充质干细胞向人韧带成纤维细胞的定向分化

发布时间：2021-03-06 02:46

　　背景:人羊膜间充质干细胞具有多向分化能力,相关研究表明Scleraxis和碱性成纤维细胞生长因子均能够促进人羊膜间充质干细胞向人韧带成纤维细胞定向分化。目的:探讨Scleraxis联合碱性成纤维细胞生长因子促进人羊膜间充质干细胞向人韧带成纤维细胞分化的效果。方法:经遵义医学院附属医院伦理委员会批准,术前签署知情同意书,取足月产胎盘羊膜组织,两步酶消化法分离人羊膜间充质干细胞,倒置相差显微镜观察细胞形态;苏木精-伊红染色观察新鲜人羊膜结构;取第3代人羊膜间充质干细胞分4组进行培养:①单纯人羊膜间充质干细胞培养组;②人羊膜间充质干细胞经Slclerxis基因慢病毒感染组;③人羊膜间充质干细胞经碱性成纤维细胞生长因子诱导组;④人羊膜间充质干细胞经Scleraxis和碱性成纤维细胞生长因子联合诱导组。细胞培养3d开始采用CCK-8法检测各组细胞增殖能力;细胞培养14 d后,实时荧光定量PCR评价各组细胞向人韧带成纤维细胞定向分化的效果。结果与结论:①第3代人羊膜间充质干细胞呈长梭形、涡旋状贴壁生长;②新鲜人羊膜呈明显的分层结构,共分为5层:上皮层、基底层、致密层、纤维母细胞层和海绵层;③人羊膜... 

【文章来源】：中国组织工程研究. 2019,23(29)北大核心

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文章快速阅读:
文题释义:
0引言Introduction
1 材料和方法Materials and methods
    1.1 设计
    1.2 时间及地点
    1.3 材料
    1.4 实验方法
        1.4.1 人羊膜间充质干细胞的分离与培养
        1.4.2 人羊膜间充质干细胞的传代
        1.4.3 苏木精-伊红染色观察羊膜结构
        1.4.4 慢病毒包装载体的构建与包装
        1.4.5 实验分组
        1.4.6慢病毒滴度测定及感染人羊膜间充质干细胞
        1.4.7 碱性成纤维细胞生长因子诱导人羊膜间充质干细胞
        1.4.8 CCK-8检测细胞活性
        1.4.9实时荧光定量PCR检测慢病毒感染人羊膜间充质干细胞后Scleraxis的表达及韧带成纤维细胞相关基因的表达
    1.5 主要观察指标
    1.6 统计学分析
2 结果Results
    2.1 人羊膜间充质干细胞的形态
    2.2 倒置显微镜下羊膜的结构
    2.3慢病毒包装载体的构建、包装与滴度检测结果
    2.4 病毒感染人羊膜间充质干细胞
    2.5碱性成纤维细胞生长因子诱导人羊膜间充质干细胞
    2.6 CCK-8检测人羊膜间充质干细胞活性
    2.7 实时荧光定量PCR检测慢病毒感染人羊膜间充质干细胞后Scleraxis的表达及韧带成纤维细胞相关基因的表达
3 讨论Discussion


【参考文献】：
期刊论文
[1]成纤维细胞生长因子诱导骨髓间充质干细胞分化腱细胞的研究[J]. 陈志达,蔡弢艺,吴进,林斌,叶永贤.  中国骨与关节损伤杂志. 2017(08)
[2]人羊膜间充质干细胞与骨髓间充质干细胞的生物学特性及免疫抑制作用的比较[J]. 洪佳琼,高雅,宋洁,卓伟彬,孙海涛,平宝红.  中国实验血液学杂志. 2016(03)
[3]体外诱导人羊膜间充质干细胞向韧带细胞分化的实验研究[J]. 金瑛,李豫皖,张承昊,吴术红,陈代雄,刘毅.  中国修复重建外科杂志. 2016(02)
[4]人羊膜间充质干细胞生物学特征及向多巴胺能神经元样细胞的分化[J]. 周文然,李新,王文波,谢燕霞,唐娜,阎影.  中国组织工程研究. 2014(23)
[5]间充质干细胞生物学特性及其分化潜能[J]. 丁志,杨松林.  中国组织工程研究与临床康复. 2011(01)



本文编号：3066304