不同途径移植脂肪来源干细胞治疗大鼠肝硬化模型的实验研究

发布时间：2017-04-18 10:10

  本文关键词：不同途径移植脂肪来源干细胞治疗大鼠肝硬化模型的实验研究，由笔耕文化传播整理发布。

【摘要】：目的：比较不同途径移植脂肪来源干细胞(adipose-derived stem cells，ADSCs)治疗肝硬化大鼠模型的疗效。 方法：从健康SD雄性大鼠腹腔脂肪组织提取ADSCs，纯化、培养并稳定传至第3代，经流式细胞术鉴定后，作为细胞移植治疗肝硬化SD雄性大鼠的种子细胞。50只SD雄性大鼠，设正常对照组（G1，n=10），其余40只采用四氯化碳与橄榄油混合液腹腔注射法建立肝硬化SD雄性大鼠模型，并随机分为：肝硬化模型对照组（G2，n=10）、门静脉移植组（G3，n=10）、肝动脉移植组（G4，n=10）、脾动脉移植组（G5，n=10），其中G1又分为G1a(细胞移植前处死正常对照组，n=5)、G1b(细胞移植后处死正常对照组，n=5)，G2又分为G2a(细胞移植前处死模型对照组，n=5)、G2b(细胞移植后处死模型对照组，n=5)；造模8周后处死G1a及G2a大鼠，取出肝脏组织做病理检查，观察是否造模成功；造模成功后G3、G4及G5分别经门静脉、肝动脉及脾动脉途径，注入ADSCs悬液1ml（细胞数约1x106）。分别于细胞移植前、移植后第4周、移植后第8周跟踪检测G1b、G2b、G3、G4及G5大鼠肝功能（包括ALB、TBIL、ALT、AST）；细胞移植后第8周处死全部大鼠，取出肝脏组织做病理检查并进行肝纤维化组织学半定量计分。 结果：从脂肪组织中分离培养的第3代细胞高表达ADSCs表面标记分子CD29(90.88%)，CD44（96.24%），CD90（95.52%），极低表达造血细胞表面分子CD34(0.08%)，CD45(0.34%)；G1a与G2a进行肝纤维化程度比较P0.05，有统计学意义；细胞移植4周后，与G2b比较，G3、G4、G53组大鼠肝功能均得到明显改善，血清白蛋白显著升高(P 0.05)，转氨酶、胆红素显著降低(P 0.05)，肝纤维化程度显著减轻(P 0.05)；G3及G4大鼠肝功能改善及肝纤维化减轻程度优于G5(P 0.05)，前两者之间无显著性差异(P0.05)。 结论：1．贴壁筛选法能便捷地从脂肪组织中分离培养出高纯度的ADSCs；2．CCl4与橄榄油混合液腹腔注射法可成功诱导出肝硬化模型；3．经门静脉、肝动脉及脾动脉三种途径移植ADSCs治疗肝硬化大鼠均可减轻肝纤维化程度，改善肝功能，门静脉及肝动脉移植途径略优于脾动脉移植途径，，并且前两者之间无明显差异。
【关键词】：肝硬化 脂肪来源干细胞 细胞移植 疗效
【学位授予单位】：福建医科大学
【学位级别】：硕士
【学位授予年份】：2014
【分类号】：R575.2;R-332
【目录】：

• 英文缩略词表4-5
• 中文摘要5-7
• Abstract7-9
• 前言9-12
• 第一部分：分离纯化获取高纯度的脂肪来源干细胞12-17
• 1 材料与方法12-14
• 2 结果14-15
• 3 讨论15-17
• 第二部分：肝硬化动物模型的建立17-23
• 1 实验材料17
• 2 实验方法17-20
• 3 结果20-22
• 4 讨论22-23
• 第三部分：脂肪来源干细胞移植对肝硬化大鼠肝脏的影响23-34
• 1 实验材料23-24
• 2 实验方法24-26
• 3 结果26-32
• 4 讨论32-34
• 结论34-35
• 参考文献35-41
• 致谢41-42
• 综述42-49
• 参考文献47-49

【参考文献】

中国期刊全文数据库 前3条

1 孙建伟;滕学仁;张其亮;戴世友;;脂肪来源间充质干细胞的研究进展[J];青岛大学医学院学报;2011年06期

2 韩德五;马学慧;赵元昌;;肝硬化动物模型的研究[J];山西医药杂志;1979年04期

3 ;肝纤维化诊断及疗效评估共识[J];药品评价;2007年04期

  本文关键词：不同途径移植脂肪来源干细胞治疗大鼠肝硬化模型的实验研究，由笔耕文化传播整理发布。

本文编号：314627