拉祜族人群PARL基因Leu262Val多态性与糖代谢异常的相关性研究及其与汉族人群的比较

发布时间：2017-04-26 23:12

  本文关键词：拉祜族人群PARL基因Leu262Val多态性与糖代谢异常的相关性研究及其与汉族人群的比较，由笔耕文化传播整理发布。

【摘要】：目的探讨聚合酶链反应—限制性片段长度多态性分析方法(PCR-RFLP)检测PARL基因Leu262Val多态性的最佳实验条件。方法运用降落PCR(touchdown PCR, TD-PCR)方法优化PCR条件；对影响PARL基因实验条件的主要因素诸如：退火温度、引物浓度、酶切体系、酶切时间等,分别设定系列梯度进行研究。设定不同温度梯度对普通PCR和降落PCR进行比较分析；对引物设定0.2umol/L、0.4umol/L、0.6umol/L和0.8umol/L四个终浓度梯度进行扩增；在酶切体系中,内切酶量不变,PCR产物量分别设定为5μl、7.5μl、10μl、12.5μl、15μl,酶切时间分别为12h过夜酶切和4h酶切,通过凝胶电泳观察结果。结果(1)降落PCR方法优于普通PCR退火温度的过程,非特异性产物量少,产物量较多易于识别,扩增片段长度为545bp。(2)引物浓度为0.4μmol/L时,扩增出的目的条带清晰,且引物二聚体少。(3)酶切体系中加入10μl扩增产物,可以获得清晰的酶切条带。(4)温度为37℃经过4小时酶切后,电泳结果清晰。结论降落PCR扩增效率优于普通PCR,其引物最适浓度为0.41μmol/L,实验循环数为32个循环；20μl的酶切体系中加入10μl扩增产物和1μl(10U)内切酶,酶切时间为4h时酶切效果最佳。 目的探讨PARL基因Leu262Val多态性与中国云南临沧地区拉祜族人群糖尿病前期及糖尿病的相关性。方法运用聚合酶链反应-限制性片段长度多态性(PCR-RFLP)分析技术,对108例糖尿病前期(PD)患者、52例糖尿病(DM)患者和308例健康对照者(NC)进行PARL基因Leu262Val多态性检测。比较分析各组间基因型和等位基因频率分布及相关临床生化指标,并根据问卷调查,运用Logistic回归评估拉祜族糖尿病前期和糖尿病的相关危险因素。结果(1)拉祜族健康对照组、糖尿病前期组和糖尿病组三组间PARL基因Leu262Val多态性位点基因型和等位基因频率分布无显著差异(P0.05)；该位点基因型频率和等位基因频率在男性和女性的分布亦无统计学差异(P0.05)。(2)PD组的女性比例、年龄、SBP、DBP、ALT、AST、BUN、CREA、UA、TC、HDL、LDL-C、FPG均高于NC组(P0.05)；DM组女性比例、年龄、ALT、AST、BUN、CREA、UA、TC、HDL-C、LDL-C、FPG均高于NC组(P0.05)；DM组CREA、FPG高于PD组(P0.05)。(3)NC组、PD组和DM组中携带PARL基因Leu262Val多态性不同基因型者的各项临床指标比较均无显著差异(P0.05)。(4)Logistic回归分析表明：在拉祜族人群中,年龄、BMI、高血压、食物烹调油、文化程度、家庭人均年收入可能是PD和DM发生的相关因素。结论PARL基因Leu262Val多态性可能与中国云南临沧地区拉祜族人群糖尿病前期及糖尿病的发生无明显相关；ALT、AST、BUN、CREA、TC、LDL-C等可能和拉祜族人群PD及DM发生有关；年龄、BMI、高血压、食物烹调油、文化程度、家庭人均年收入可能是PD和DM发生的相关因素。 目的探讨PARL基因Leu262Val多态性和中国云南昆明地区汉族人群2型糖尿病的相关性。方法运用聚合酶链反应-限制性片段长度多态性(PCR-RFLP)分析技术,对145例糖尿病患者和111例健康对照者进行PARL基因Leu262Val多态性检测,对各组间基因型和等位基因分布频率进行比较,并评价相关临床资料和生化指标。结果(1)糖尿病组和健康对照组两组间三种基因型分布和等位基因频率比较无统计学差异(P0.05)；该位点基因型和等位基因频率在男性和女性的分布亦无统计学差异(P0.05)。(2)NC组年龄、BMI、SBP、DBP、TG、LDL-C、 CREA、ALT、FPG水平均低于DM组,HDL-C水平高于DM组(P0.05)。(3)分别比较NC组和DM组中携带该多态性位点不同基因型的临床及生化指标,指标在GG型和CC+GC型两组间比较无统计学差异(P0.05)。结论昆明地区汉族人群中PARL基因Leu262Val多态性可能与2型糖尿病的发生无相关性；SBP、DBP、TG、LDL-C等可能和IT2DM发生相关。 目的对PARL基因Leu262Val多态性在中国云南临沧地区拉祜族和昆明地区汉族人群中是否存在异质性进行探讨。方法根据之前的研究,选取360例拉祜族人群(其中308例健康对照人群,52例糖尿病人群)、256例汉族人群(其中111例健康对照人群,145例糖尿病人群)。比较分析两民族间PARL基因Leu262Val多态性位点的基因型和等位基因分布频率、并评价相关临床资料和生化指标。结果(1)拉祜族和汉族总体人群的基因型及等位基因分布频率不同,差异有显著性统计学意义(P0.001)。(2)拉祜族与汉族健康对照人群基因型和等位基因分布频率不同,差异有显著性统计学意义(P0.001)。(3)拉祜族与汉族糖尿病人群基因型和等位基因分布频率不同,有统计学意义(P0.05)。(4)两民族正常人群中,汉族年龄、ALT、BUN、CREA、TC、HDL-C、LDL-C水平均高于拉祜族(P0.05)。(5)两民族糖尿病人群中,汉族ALT、TG水平高于拉祜族,SBP、AST、CREA、UA水平低于拉祜族,(P0.05)。结论拉祜族人群和汉族人群PARL基因Leu262Val多态性位点的基因型频率及等位基因分布频率可能存在种族差异。
【关键词】：聚合酶链反应 限制性片段长度多态性 实验条件 早老素相关菱形样蛋白(PARL) 拉祜族 PARL基因 多态性 糖尿病前期 2型糖尿病 糖尿病 2型 PARL基因 多态性 糖尿病 2型 PARL基因 种族差异 遗传异质性
【学位授予单位】：昆明医科大学
【学位级别】：硕士
【学位授予年份】：2013
【分类号】：R587.1;R3416
【目录】：

• 文中主要英文缩写6-8
• 第一部分8-10
• 摘要8-9
• Abastract9-10
• 第二部分10-13
• 摘要10-11
• Abastract11-13
• 第三部分13-15
• 摘要13-14
• Abastract14-15
• 第四部分15-17
• 摘要15-16
• Abastract16-17
• 第一部分 PCR-RFLP方法检测PARL基因Leu262Val多态性的实验研究17-30
• 第二部分 拉祜族人群中PARL基因Leu262Val多态性与糖尿病前期和糖尿病的相关性研究30-43
• 第三部分 汉族人群中PARL基因Leu262Val多态性与2型糖尿病相关性研究43-52
• 第四部分 拉祜族和汉族人群中PARL基因Leu262Val多态性的比较52-61
• 综述61-71
• 参考文献68-71
• 攻读学位期间发表文章情况71-72
• 致谢72

【参考文献】

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1 唐伟;高远;俞丹;杨涛;;中老年血脂异常人群易患糖代谢异常的研究[J];实用老年医学;2011年02期

  本文关键词：拉祜族人群PARL基因Leu262Val多态性与糖代谢异常的相关性研究及其与汉族人群的比较，，由笔耕文化传播整理发布。

本文编号：329432