探讨人未成熟卵母细胞体外培养成熟的价值

发布时间：2017-04-27 02:06

  本文关键词：探讨人未成熟卵母细胞体外培养成熟的价值，由笔耕文化传播整理发布。

【摘要】：目的: 研究来源于常规超排卵周期体外受精-胚胎移植或卵胞浆内单精子注射（IVF/ICSI-ET）的未成熟卵母细胞，观察其在商品化IVM培养液中以及人输卵管液（HTF）中体外培养成熟、受精、胚胎发育及囊胚形成能力，探讨人未成熟卵母细胞在体外成熟后的应用价值。 方法: 选择在我中心行常规超排卵周期IVF/ICSI-ET助孕的58例患者，将周期中获得的未成熟卵母细胞按照不同培养液培养（IVM培养液和HTF培养液），不同开始培养时间（取卵后4h.10h.24h），不同生长阶段（GV期和MI期），不同成熟来源（体内和体外）等分组。将未成熟卵母细胞进行体外成熟培养，成熟卵子行ICSI授精后进行胚胎培养，第三天选择1,2级胚胎进行囊胚培养。比较分析上述分组的卵母细胞成熟率，受精率，卵裂率和1,2级胚胎率等情况。 结果: 1.两组培养液中，IVM组成熟率，受精率，卵裂率，1,2级胚胎率均高于HTF组，受精率差异有统计学意义（68.57%和36.73%，P＜0.05）。 2.两组培养液中开始培养的时间D24h组与D4h组相比，成熟率，受精率，卵裂率均差于D4h组，受精率（P＜0.05）均有统计学意义。两种液体中D10h与D4h相比，成熟率，受精率，卵裂率虽较D4h组差，统计学是无差异的。 3.IVM培养液中，MI期卵母细胞的成熟率，受精率，卵裂率均高于GV期卵母细胞，，成熟率（80.36%和55.55%，P＜0.01）和卵裂率（71.11%和64%，P＜0.05）差异有统计学意义。在HTF培养液中，MI期卵母细胞的成熟率，受精率，卵裂率均高于GV期，其中成熟率（68.89%和43.9%，P＜0.01）和受精率（41.93%和27.77%，P＜0.05）差异有统计学意义。 4.体外的IVM组和HTF组与同源体内组相比，卵裂率（77.08%，72.22%，92.71. P＜0.05），1,2级胚胎率（59.45%，30.76%,79.84%.P＜0.05）均低于同源体内组，统计学差异具有显著性。HTF组与同源体内组相比受精率（36.73%和65.92%，P＜0.05）差异有统计学意义。 5.187个未成熟卵母细胞经体外培养成熟后得到的26个1,2级胚胎进行囊胚培养共形成5个囊胚。 结论: 1.控制性超排卵周期中获得的未成熟卵母细胞能够在体外发育成熟并形成正常受精的胚胎。 2.未成熟卵母细胞在IVM培养液比在HTF培养液中培养更有利于卵母细胞的发育。 3.IVM开始培养的时间可以选在取卵后10h内进行。 4.正常超排卵周期获得的MI期的卵母细胞体外培养比GV期的卵母细胞体外培养更容易成熟且得到质量较好的胚胎。 5.未成熟卵母细胞经体外培养成熟后仍有形成囊胚的潜能。
【关键词】：未成熟卵母细胞 体外培养 卵胞浆内单精子显微注射 囊胚
【学位授予单位】：南昌大学
【学位级别】：硕士
【学位授予年份】：2013
【分类号】：R329.2
【目录】：

• 摘要3-5
• ABSTRACT5-10
• 第1章 前言10-14
• 第2章 材料与方法14-22
• 2.1 研究对象与分组14-15
• 2.1.1 研究对象14
• 2.1.2 分组情况14-15
• 2.1.3 周期入选标准15
• 2.2 主要仪器，试剂及试剂的配制15-17
• 2.2.1 主要仪器15
• 2.2.2 主要使用的试剂15-16
• 2.2.3 主要试剂的配置16-17
• 2.3 方法17-21
• 2.3.1 常规促排卵及取卵17
• 2.3.2 筛卵17
• 2.3.3 未成熟卵母细胞的获取17-18
• 2.3.4 未成熟卵母细胞体外培养以及其成熟观察18
• 2.3.5 精液的洗涤18-19
• 2.3.6 ICSI 授精19-20
• 2.3.7 观察受精情况20
• 2.3.8 胚胎培养及胚胎评估20
• 2.3.9 囊胚培养及冷冻20-21
• 2.4 成熟率、受精率、卵裂率等的计算21
• 2.5 统计学方法21-22
• 第3章 结果22-26
• 3.1 入选周期的资料22
• 3.2 两组不同培养液的临床资料结果22-23
• 3.3 未成熟卵在两种培养液中体外培养成熟情况23
• 3.4 两组培养液中三个时间段开始培养的未成熟卵母细胞体外成熟的情况23-24
• 3.5 两种培养液中不同生长阶段的未成熟卵母细胞体外培养成熟的情况24-25
• 3.6 体内成熟与体外成熟的卵母细胞情况对比25-26
• 第4章 讨论26-32
• 4.1 IVM 前期体内 Gn 的应用26-27
• 4.2 培养液对 IVM 的影响27
• 4.3 培养液中不同生长阶段成熟的卵子的情况27-28
• 4.4 开始培养的时间对 IVM 的影响28
• 4.5 精液对 IVM 的影响28-29
• 4.6 胚胎发育以及形成囊胚的能力29-30
• 4.7 IVM 过程中存在的问题30-32
• 第5章 结论32-33
• 致谢33-34
• 参考文献34-38
• 附图38-42
• 攻读学位期间的研究成果42-43
• 综述43-50
• 参考文献48-50

  本文关键词：探讨人未成熟卵母细胞体外培养成熟的价值，由笔耕文化传播整理发布。

本文编号：329681