成纤维细胞生长因子21（FGF21）通过SIRT1通路抑制棕榈酸酯诱导的人肝细胞脂肪堆积和炎症反应

发布时间：2021-07-27 04:22

　　目的研究成纤维细胞生长因子21（FGF21）对棕榈酸酯诱导的人肝细胞脂肪堆积、炎症因子表达的作用及其机制。方法采用组蛋白去乙酰化酶转录沉默信息调节因子1（SIRT1）短发夹RNA（shRNA）慢病毒,建立L02SIRT1稳定敲低细胞系;L02细胞以及SIRT1敲低细胞系给予棕榈酸酯（palmitate）处理,建立高脂细胞模型,在此基础上给予FGF21,检测细胞甘油三酯（TG）、丙二醛（MDA）水平;ELISA检测细胞肿瘤坏死因子α（TNF-α）和白细胞介素6（IL-6）水平;MitoSOX染色结合流式细胞术检测细胞线粒体活性氧（ROS）水平;实时定量PCR检测SIRT1、过氧化物酶体增殖物激活受体辅激活因子1α（PGC1α）、超氧化物歧化酶2（SOD2）以及过氧化氢酶（CAT）的mRNA水平;Western blot法检测SIRT1、 PGC1α、 SOD2、 CAT蛋白水平;JC-1染色结合激光共聚焦检测线粒体膜电位;Seahorse XF细胞线粒体压力测试试剂盒检测线粒体氧化呼吸功能。结果棕榈酸酯可增加L02细胞内TG水平,引起细胞和线粒体氧化应激,降低SIRT1、 PGC1α、 ... 

【文章来源】：细胞与分子免疫学杂志. 2019,35(07)北大核心CSCD

【文章页数】：7 页

【文章目录】：
1 材料和方法
    1.1 材料
    1.2 方法
        1.2.1 细胞培养、 分组和处理
        1.2.2 L02细胞线粒体ROS检测
        1.2.3 JC-1染色检测L02细胞线粒体膜电位
        1.2.4 L02细胞线粒体耗氧量分析
        1.2.5 实时定量PCR检测L02细胞SOD2、 CAT、 SIRT1、 PGC1α的mRNA水平
        1.2.6 Western blot法检测L02细胞SOD2、 CAT、 SIRT1、 PGC1α的蛋白水平
        1.2.7 统计学分析
2 结果
    2.1 FGF21抑制棕榈酸酯处理的L02细胞脂肪变、 炎症反应以及氧化应激
    2.2 FGF21改善棕榈酸酯处理的L02细胞的线粒体氧化应激状态及线粒体功能
    2.3 通过SIRT1依赖的通路, FGF21改善棕榈酸酯处理的L02细胞中脂质堆积以及氧化应激, 抑制细胞炎症因子分泌
    2.4 通过激活SIRT1依赖的通路, FGF21改善线粒体氧化应激损伤
3 讨论



本文编号：3305068