扩张型心肌病转基因小鼠模型的建立和心肌病修饰基因的筛选

发布时间：2021-09-08 14:05

　　目的建立cTnT^R141W扩张型心肌病的转基因小鼠模型。方法把cTnT^R141W基因插入α-MHC启动子下游,构建转基因表达载体,通过显微注射法建立cTnT^R141W转基因C57BL/6J小鼠。PCR鉴定cTnT^R141W转基因小鼠的基因表型,Realtime PCR检测基因的拷贝数,Northern blotting检测基因表达,组织学和电镜检测cTnT^R141W转基因小鼠心脏的病理改变。免疫组织化学检测突变的cTnT蛋白的定位。超声心动图检测cTnT^R141W转基因小鼠心脏的结构和功能。记录cTnT^R141W转基因小鼠的生存状况。逆转录PCR检测cTnT^R141W转基因小鼠的心脏肥大分子标志物。结果建立了3个系的cTnT^R141W转基因小鼠。3个系的基因拷贝数分别是15、20和59拷贝。cTnT^R141W的表达水平是内源性cTnT的1.5倍～2.0倍。cTnT

【文章来源】：北京协和医学院北京市 211工程院校 985工程院校

【文章页数】：126 页

【学位级别】：博士

【部分图文】：

cTnTR，4’w基因在转基因小鼠中的表达

四、cTnT“’4‘w转基因小鼠心脏的病理表型将4月龄cTnTR川w转基因小鼠和野生型小鼠的心脏进行病理解剖，观察到cTnT“’4‘w转基因小鼠的心脏明显大于野生型小鼠的心脏(图4A一B)。HE染色可见cTnTR，4’w转基因小鼠全心扩大，室壁明显变薄;高倍镜下可见心肌细胞不均匀肥大(图4C一F)，Masson染色可见。TnT“’4’w心肌间质纤维明显增多(图4G一H)。

六、突变的cTnT蛋白的定位激光共聚焦扫描显微镜观察显示，突变的cTnT蛋白聚集在转基因小鼠心脏的肌小节中(图6)。图6突变的cTnT蛋白的定位。A、野生型小鼠心脏;B、首建系 1cTnT“’4’w转基因小鼠心脏。放大倍数: x1500。

【参考文献】：
期刊论文
[1]cTnTR92Q转基因小鼠肥厚型心肌病模型的建立[J]. 董伟,冯娟,全雄志,陈炜,祝梅香,刘亚莉,张连峰.  中国比较医学杂志. 2008(05)
[2]分子成像及其应用[J]. 蒋星军,任彩萍.  生命科学. 2005(05)
[3]建立阿尔茨海默症的转基因动物模型[J]. 常洋,秦川,尹红星,朱华,蔡有余.  解剖学报. 2000(02)



本文编号：3390920