硫酸葡聚糖佐剂和酵母多糖—角鲨烯复合佐剂对甲肝和乙肝抗原诱导小鼠体液免疫应答的增强作用

发布时间：2017-05-02 19:00

  本文关键词：硫酸葡聚糖佐剂和酵母多糖—角鲨烯复合佐剂对甲肝和乙肝抗原诱导小鼠体液免疫应答的增强作用，，由笔耕文化传播整理发布。

【摘要】：随着分子生物学技术的飞速发展,目前采用基因重组等生物技术制备了大量的基因工程疫苗、纯化亚单位疫苗、合成肽疫苗等新型疫苗,这些新型疫苗普遍存在免疫原性相对较弱的问题,需要免疫佐剂的帮助才能有效地引发机体免疫应答。因此,新型疫苗佐剂的研究和开发对于新型疫苗的开发与应用有重要的推动作用,寻找更为安全有效的新型疫苗佐剂具有重大的意义。本研究对硫酸葡聚糖佐剂和酵母多糖-角鲨烯复合佐剂两种佐剂进行了佐剂效应研究。硫酸葡聚糖对免疫系统有一定的刺激作用,能引起细胞介导的免疫反应,增强T细胞反应,被广泛应用于兽用疫苗的研究,能有效提高动物的抗体产生水平。酵母多糖是一种大分子多糖复合物,能够增强机体免疫反应。角鲨烯被广泛应用于药物和疫苗的呈递,能够稳定提高药物和疫苗的效果。 本研究旨在评价硫酸葡聚糖佐剂和酵母多糖-角鲨烯复合佐剂对甲肝和乙肝抗原诱导小鼠体液免疫应答的影响。将不同剂量的两种硫酸葡聚糖(分子量-5000和分子量36000-50000)和酵母多糖-角鲨烯复合佐剂分别与HBsAg混合,经皮下免疫1CR小鼠,采用间接ELISA法检测小鼠血清中抗HBsAg IgG抗体水平。筛选出效果较好的硫酸葡聚糖佐剂及其最佳免疫剂量和酵母多糖-角鲨烯复合佐剂的最佳免疫剂量,分别将最佳免疫剂量的两种佐剂与HAV抗原混合经皮下免疫ICR小鼠，采用间接ELISA法检测小鼠血清中抗HAV抗原IgG抗体水平。并将最佳免疫剂量的两种佐剂分别与HBsAg和HAV抗原混合经鼻腔粘膜免疫小鼠,采用间接ELISA法来检测血清特异性lgG抗体水平。并对两种佐剂的安全性进行初步观察。 结果显示：在皮下免疫途径中,分子量36000-50000的硫酸葡聚糖对HBsAg的体液免疫增强效果优于分子量-5000的硫酸葡聚糖；硫酸葡聚糖(36000-50000)的最佳免疫剂量为2mg,且8周时血清抗HBsAg IgG水平与铝佐剂对照组相近(分别为1：718和1：761),表明硫酸葡聚糖对HBsAg有较好的体液免疫增强效果；酵母多糖-角鲨烯复合佐剂对HBsAg的最佳免疫剂量为2mg酵母多糖+8μl角鲨烯,该组抗HBsAg IgG抗体水平高于铝佐剂对照组和酵母多糖对照组。硫酸葡聚糖佐剂对HAV抗原有一定的体液免疫增强效果,但效果不显著；酵母多糖-角鲨烯复合佐剂对HAV抗原有显著的体液免疫增强作用,lgG抗体水平高于铝佐剂对照组和酵母多糖对照组。在鼻腔免疫途径中,硫酸葡聚糖佐剂对HBsAg和HAV抗原的体液免疫有一定的增强作用(8周时抗体滴度分别为1：28和1：92),酵母多糖-角鲨烯复合佐剂对HBsAg和HAV抗原的体液免疫应答也有增强作用(8周时抗体滴度分别为1：34和1：320),但鼻腔免疫途径的体液免疫效果均不如皮下免疫途径。实验期内,小鼠均未出现异常反应,组织切片表明各器官均未发生病变。由此证实：硫酸葡聚糖佐剂(36000-50000)对HBsAg有较好的体液免疫增强效果；酵母多糖-角鲨烯复合佐剂能显著增强HBsAg和HAV抗原对小鼠的体液免疫应答,增强作用优于铝佐剂；皮下免疫途径优于鼻腔免疫途径,而且在免疫剂量范围内,硫酸葡聚糖佐剂和酵母多糖-角鲨烯复合佐剂未见明显的毒副作用。
【关键词】：硫酸葡聚糖 酵母多糖 角鲨烯 佐剂 乙肝表面抗原(HBsAg) 甲型肝炎病毒抗原(HAV抗原)
【学位授予单位】：北京协和医学院
【学位级别】：硕士
【学位授予年份】：2013
【分类号】：R392
【目录】：

• 摘要4-6
• Abstract6-8
• 前言8-16
• 第一部分 硫酸葡聚糖佐剂对体液免疫应答的增强效果研究16-28
• 一、材料与方法16-21
• (一) 实验材料16
• (二) 实验方法16-21
• 二、结果与分析21-25
• (一) 硫酸葡聚糖佐剂对HBsAg的体液免疫增强作用21-22
• (二) 硫酸葡聚糖佐剂对HAV抗原的体液免疫增强作用22-24
• (三) 硫酸葡聚糖佐剂分别与HBsAg和HAV抗原通过鼻腔免疫诱导体液免疫应答的效果研究24-25
• (四) 硫酸葡聚糖佐剂安全性的初步观察25
• 三、讨论25-27
• 四、小结27-28
• 第二部分 酵母多糖-角鲨烯复合佐剂对体液免疫应答的增强效果研究28-40
• 一、材料与方法28-32
• (一）实验材料28-29
• (二）实验方法29-32
• 二、结果与分析32-37
• (一) 酵母多糖-角鲨烯复合佐剂对HBsAg的体液免疫增强作用32-34
• (二) 酵母多糖-角鲨烯复合佐剂对HAV抗原的体液免疫增强作用34-35
• (三) 酵母多糖-角鲨烯复合佐剂分别与HBsAg和HAV抗原通过鼻腔免疫诱导体液免疫应答的效果研究35-36
• (四) 酵母多糖-角鲨烯复合佐剂安全性的初步观察36-37
• 三、讨论37-39
• 四、小结39-40
• 参考文献40-46
• 附录46-49
• 致谢49-50
• 个人简历50-51

【参考文献】

中国期刊全文数据库 前6条

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  本文关键词：硫酸葡聚糖佐剂和酵母多糖—角鲨烯复合佐剂对甲肝和乙肝抗原诱导小鼠体液免疫应答的增强作用，由笔耕文化传播整理发布。

本文编号：341476