HBV DNA免疫引起多器官病理损伤及其机制的实验研究

发布时间：2021-10-22 02:37

　　乙型肝炎病毒（hepatitis B virus，HBV）是一种闭合环状DNA，能够引起以淋巴单核细胞浸润和枯否细胞过度增生为主要特征的急慢性肝炎。具有免疫功能的成年人的HBV感染常常导致自限性的、短暂的肝损伤和病毒清除。只有很少比例的感染者（5％～10％）形成与病毒持续感染相关的慢性肝炎。然而，当新生儿感染时，超过90％的感染者将转成持续感染者，并形成不同程度的肝脏损伤。 DNA免疫是指将含有编码某种特异抗原的外源基因及其必要表达调控元件的真核表达质粒直接导入机体内，以诱导机体表达编码序列的蛋白，并经体内抗原呈递细胞（APC）处理，刺激机体免疫系统产生保护性免疫应答，包括特异性CTL应答及特异抗体的产生等等。因此DNA疫苗被认为是一种极具发展潜力的第三代疫苗，在许多疾病的治疗和预防方面显示出广泛的应用前景。 HBV形成慢性感染的主要机制在于感染者不能产生强有力的细胞免疫应答以清除病毒。慢性HBV感染者体内虽然存在HBV抗原特异性T淋巴细胞，但对HBV抗原的反应性较低。与亚单位重组疫苗相比，DNA介导的免疫反应更能有效地激发机体对乙型肝炎表面抗原的免疫反应，有效诱导细胞免疫... 

【文章来源】：郑州大学河南省 211工程院校

【文章页数】：143 页

【学位级别】：博士

【部分图文】：

PreSZ一S目的基因片段的扩增Figure4AmPlificationofPreSZ一5tetgene

3.3重组质粒pOD八兄占?心的DNA序列测定结果真核表达质粒pcD入%S2一S的D入只序列测定以T7引物及SP6引物双向测序，测序结果表明，其序列与质粒图谱(pBR322HBV/adr)一致，图7示T7引物部

3.4.2重组RBsAg基因在培养细胞中的定量表达为了确定重组刀&月g基因在培养细胞中的传代表达情况，将该载体电穿孔法转染7721细胞并用以18筛选，然后进行免疫组化及认范sternblotting检测其表达情况。结果见图9，图10l:7721eellh，犯strans丘ctedwithPcl〕蒯i贷一S2:7721transfeetedwlthPcl)蒯3.0图91丸注〕删52.5在7721细胞系中的表达FlgtiregTheexPressionofPcD入月S2一Sm772leelline33KDl:7721eellllneZ:7721trans众冷tedwlthPcl〕汉刁3刀3:7721eelllinestransfeetedwithPcl〕州心一S4:10pgHBS刁g图10两邵叮e」。TheeXPreSSIwestemblot检测月男3月g的表达onofP‘J〕删月叹2目S山tectedbyusingwesternblot结果显示月百占月g蛋白在筛选后的7721细胞株传代过程中可高效表达。分泌的颗粒用抗甲HBS抗体来确认(图10)，以上结果都表明:构建的这种载体适合于作刀瓦」免疫。4正常BALB’/c小鼠的刀况刁免疫及抗.nBs的测定结果

【参考文献】：
期刊论文
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本文编号：3450215