钩端螺旋体groEL基因原核表达及其产物免疫保护作用

发布时间：2017-05-04 15:18

  本文关键词：钩端螺旋体groEL基因原核表达及其产物免疫保护作用，由笔耕文化传播整理发布。

【摘要】：目的:构建问号钩端螺旋体(简称钩体)黄疸出血群赖型赖株groEL基因原核重组表达系统,了解重组表达的GroEL蛋白(rGroEL)对金地鼠的免疫保护作用。方法:采用高保真PCR扩增问号钩体赖株groEL基因并测序,常规方法构建groEL基因原核表达系统。采用SDS-PAGE联合Bio-Rad凝胶图像分析系统检查rGroEL表达情况及其可溶性,Ni-NTA亲和层析法提纯rGroEL。观察rGroEL免疫金地鼠对问号钩体赖株感染的保护率。采用MAT法检测免疫动物血清与我国流行问号钩体血清群交叉凝集效价。结果:所克隆的groEL基因核苷酸和氨基酸序列与GenBank中相应基因完全相同。所构建的groEL基因原核表达系统能表达可溶性rGroEL。100和200μgrGroEL对金地鼠的免疫保护率分别为50.0%和75.0%。rGroEL免疫金地鼠血清可不同程度地凝集各问号钩体血清群。结论:GroEL蛋白是问号钩体属特异性保护性抗原,可用于制备通用性钩体基因工程疫苗。
【作者单位】： 浙江中医药大学生命科学学院;浙江大学医学院病原生物学系;
【关键词】： 问号钩端螺旋体 GroEL蛋白质/遗传学 重组 遗传 基因表达 序列分析 DNA 免疫法 被动 groEL基因 原核表达 免疫保护
【基金】：传染病国家科技重大专项资助项目(2008ZX10004-015)
【分类号】：R377.5
【正文快照】： 由致病性钩端螺旋体(Leptospira)(简称钩体)感染引起的钩体病是全球流行的人兽共患传染病,我国是该病的主要疫区之一[1-2]。钩体病通过疫水迅速传播,极易引起暴发流行,故钩体病是我国重点监控的传染病之一。致病性钩体自然宿主和血清群众多,仅我国即有18个血清群,但各血清群之

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本文编号：345335