参归益智方对阿尔茨海默病模型大鼠VEGF、P38MAPK表达的影响

发布时间：2017-05-08 10:05

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【摘要】：目的：阿尔茨海默病(Alzheimer's disease，，AD)是一种中枢神经系统退行性疾病，临床表现为记忆认知障碍、情感性格及行为改变等。随着社会的发展，人口老龄化日趋明显，65岁以上，每增加5岁，AD发病率就会提高1倍，一半以上AD患者是85岁以上老年人，预计2050年后，AD患病率将是目前的4倍，甚至更高[1]。血管内皮生长因子(Vascularendothelial growth factor，VEGF)是血管内皮细胞分泌的血管生成促进因子，是一种高度特异性的血管内皮细胞有丝分裂原，也是一种高效的血管形成和血管通透性诱导因子，在AD生理和病理过程中发挥重要作用[2]。P38MAPK是丝裂原活化蛋白激酶家族的成员之一，广泛存在于哺乳动物细胞内，可由缺血缺氧、炎症因子、氧自由基、内毒素等激活，激活后进入细胞核内，介导炎症、凋亡等生物学效应[3]，同时P38MAPK还能激活大量炎症因子，而炎症因子又可强烈激活P38MAPK通路，形成一个不断增强的正反馈途径，炎症反应逐渐被放大，直接损伤神经元，最终导致记忆力及认知功能障碍[4]。近年来研究AD的许多学者认为，AD患者存在血管功能障碍，脑缺血与AD间存在密切的联系，脑缺血加速了AD患者的神经变性进程，对AD模型大鼠脑组织中直接注入VEGF后，可出现新血管生成，说明外源性VEGF可以有效的改善缺血组织的血液供应，增加新生血管的数量，减轻海马组织的损伤，从而改善AD模型大鼠的学习记忆能力[5]。本研究从血管内皮功能在AD中的作用作为切入点，观察参归益智方对双侧海马区注射Aβ1-42所致的阿尔茨海默病大鼠海马CA1区VEGF，P38MAPK及磷酸化P38MAPK蛋白的表达的影响，探讨AD发病机理及参归益智方对AD的治疗作用机制。 方法：健康清洁级SD雄性大鼠40只，按照随机数字表法，随机分为空白组，模型组，低剂量组和高剂量组，每组10只。采用立体定位仪向大鼠双侧海马区注射凝聚态Aβ1-42各5μl建立AD动物模型。造模1周后通过Morris水迷宫实验，检测实验动物学习记忆能力；2周后，低剂量按12.5g/kg，高剂量按25g/kg灌胃给药，对照组仅给予相应体积的生理盐水，药物干预共4周，每日2次。通过HE染色观察大鼠海马CA1区锥体细胞的形态学变化，通过免疫组织化学法检测大鼠海马CA1区VEGF的表达；提取大鼠海马组织总蛋白，蛋白定量BCA法测蛋白浓度，采用Western Blot法检测P38MAPK及磷酸化P38MAPK蛋白的表达水平。 结果：1、Morris水迷宫实验：造模1周后，4组大鼠逃避潜伏期不同(F=102.332，P0.05)，穿越平台次数不同(F=8.487，P0.05)。模型组，低剂量组和高剂量组比空白组逃避潜伏期明显延长(P0.05)，穿越平台次数明显减少(P0.05)。2、HE染色：空白组海马CA1区锥体细胞排列整齐，形态正常，结构致密，分布均匀，数量多；模型组海马CA1区神经元细胞排列稀疏，明显减少，结构紊乱，数量减少；治疗组与模型组大鼠相比，各治疗组大鼠海马形态均不同程度恢复，以高剂量组最为明显，神经元数量增多，细胞排列较整齐，结构较致密，形态较正常，分布较均匀。3、VEGF的表达：4组大鼠海马CA1区VEGF阳性细胞数不同(F=105.859，P0.05)，模型组比空白组明显减少(P0.05)，低剂量组比模型组明显增多(P0.05)，高剂量组比模型组明显增多(P0.05)，高剂量组比低剂量组增多(P0.05)。4、P38MAPK在4组大鼠海马组织表达水平无明显变化(F=1.487，P0.05)；磷酸化P38MAPK在4组大鼠海马组织表达不同(F=87.156，P0.05)，模型组比空白组表达明显升高(P0.05)，低剂量组比模型组表达降低(P0.05)，高剂量组比低剂量组表达明显降低(P0.05)。 结论：1、采用凝聚态Aβ1-42注射双侧大鼠海马区制作AD模型，大鼠出现了学习记忆能力减退，说明AD模型制作成功。2、参归益智方能改善AD大鼠的学习记忆能力。3、AD模型大鼠海马组织磷酸化P38MAPK表达增强，VEGF表达减弱。4、参归益智方可降低AD大鼠大脑海马组织磷酸化P38MAPK的表达，增高VEGF的表达。
【关键词】：参归益智方 阿尔茨海默病 Aβ1-42 血管内皮生长因子P38MAPK
【学位授予单位】：河北医科大学
【学位级别】：硕士
【学位授予年份】：2013
【分类号】：R-332;R285.5;R749.16
【目录】：

• 摘要4-6
• ABSTRACT6-9
• 前言9-10
• 材料与方法10-16
• 结果16-18
• 附图18-27
• 附表27-28
• 讨论28-34
• 结论34-35
• 参考文献35-40
• 综述 血管内皮功能在阿尔茨海默病中的研究进展40-47
• 参考文献44-47
• 致谢47-48
• 个人简历48

【参考文献】

中国期刊全文数据库 前10条

1 张丽娜;金国琴;;熟地黄有效成分5-HMF对皮质酮损伤型海马神经元GCR、BDNF、SGK表达的影响[J];中华中医药杂志;2012年04期

2 刘祥琴;刘小琦;晏宁;;老年性痴呆患者血浆NO和H_2S的变化及意义[J];重庆医学;2012年01期

3 张桂莲;姚丽;杜峗;张茹;卜宁;刘t熃

本文编号：350919