Hey1基因参与调控BMP9诱导的C3H10T1/2细胞成骨分化
发布时间：2022-01-04 19:20
目的:观察发状分裂相关增强子Hey1在骨形态发生蛋白9（BMP9）诱导的小鼠间充质干细胞（MSCs）C3H10T1/2成骨分化中的作用。方法:包装Hey1、BMP9以及GFP的过表达慢病毒,并分别作用于C3H10T1/2细胞,RT-PCR和Western blot检测Hey1、BMP9以及GFP的慢病毒是否包装成功,碱性磷酸酶（ALP）检测早期成骨指标ALP的变化,茜素红S染色检测晚期成骨指标钙盐沉积,MTT检测Hey1对BMP9调控的C3H10T1/2细胞增值的影响,流式细胞术检测Hey1对BMP9调控的C3H10T1/2细胞周期的影响。结果:Hey1、BMP9以及GFP的慢病毒包装成功;在成骨分化早期,过表达Hey1基因可促进BMP9调控的C3H10T1/2细胞的成骨分化与增殖;在成骨分化晚期,过表达Hey1基因可促进BMP9诱导的C3H10T1/2细胞的成骨分化,并将BMP9调控的C3H10T1/2细胞周期阻滞在G1期。结论:Hey1基因可参与调控BMP9诱导的小鼠C3H10T1/2细胞的早晚期成骨分化,并对细胞的增殖与周期有一定的影响。
【文章来源】：中国生物工程杂志. 2015,35(06)北大核心CSCD
【文章页数】：7 页
【部分图文】：
Hey1、BMP9以及GFP的过表达慢病毒包装成功Fig．1TheexpressionofGFP，BMP9andHey1
2015，35(6)唐大刚等:Hey1基因参与调控BMP9诱导的C3H10T1/2细胞成骨分化图2Hey1基因影响BMP9诱导的C3H10T1/2细胞早期成骨分化Fig．2EffectofHey1geneonBMP9-inducedearlyosteogenicdifferentiationofC3H10T1/2cells成骨指标钙盐沉积。结果显示，单独BMP9组可明显诱导钙盐沉积，而LV5-Hey1促进了BMP9诱导的C3H10T1/2细胞晚期成骨分化(图3)。综上所述，Hey1基因可促进BMP9诱导的小鼠C3H10T1/2细胞早晚期成骨分化。2．4Hey1基因对BMP9诱导的C3H10T1/2细胞增殖的影响有研究报道，Hey1基因可影响细胞的增殖［13-14］。在Hey1基因影响BMP9诱导的小鼠C3H10T1/2细胞早晚期成骨分化的基础上进一步探讨Hey1基因对BMP9参与调控的细胞增殖的影响，用LV5-Hey1和LV5-GFP感染C3H10T1/2细胞24h后，加入适当滴度(30%)的LV5-BMP9，分别在处理后24、48和72h用图3Hey1基因影响BMP9诱导的C3H10T1/2细胞晚期成骨分化Fig．3EffectofHey1geneonBMP9-inducedlaterosteogenicdifferentiationofC3H10T1/2cellsMTT方法检测细胞的增值，结果显示，单独BMP9组对细胞的增殖有部分抑制作用，而LV5-Hey1促进了BMP9调控的C3H10T1/2细胞的增殖(P＜0．05)(图4)。图4Hey1基因影响BMP9调控的C3H10T1/2细胞的增殖Fig．4EffectofHey1geneonBMP9-regulatedproliferationofC3H10T1/2cells2．5Hey1基因对BMP9调控的C3H10T1/2细胞周期的影响在上述探讨Hey1基因对BMP9调控的C3H10T1/2细胞增值的影响的基础上，进一步探讨Hey1基因对BMP9调控的C3H10T1/2细胞周期的作用。用LV5-Hey1和LV5-GFP感染C3H10T1/2细胞24h后，加入适当滴度的LV5-BMP9，分别在处理后4、5、6和7d通过流式细胞术检测细胞周期的变化，结果显示，在晚期，单独BMP9组可缩短细胞的G1期从而促进?
＝峁?允荆?ザ繠MP9组可明显诱导钙盐沉积，而LV5-Hey1促进了BMP9诱导的C3H10T1/2细胞晚期成骨分化(图3)。综上所述，Hey1基因可促进BMP9诱导的小鼠C3H10T1/2细胞早晚期成骨分化。2．4Hey1基因对BMP9诱导的C3H10T1/2细胞增殖的影响有研究报道，Hey1基因可影响细胞的增殖［13-14］。在Hey1基因影响BMP9诱导的小鼠C3H10T1/2细胞早晚期成骨分化的基础上进一步探讨Hey1基因对BMP9参与调控的细胞增殖的影响，用LV5-Hey1和LV5-GFP感染C3H10T1/2细胞24h后，加入适当滴度(30%)的LV5-BMP9，分别在处理后24、48和72h用图3Hey1基因影响BMP9诱导的C3H10T1/2细胞晚期成骨分化Fig．3EffectofHey1geneonBMP9-inducedlaterosteogenicdifferentiationofC3H10T1/2cellsMTT方法检测细胞的增值，结果显示，单独BMP9组对细胞的增殖有部分抑制作用，而LV5-Hey1促进了BMP9调控的C3H10T1/2细胞的增殖(P＜0．05)(图4)。图4Hey1基因影响BMP9调控的C3H10T1/2细胞的增殖Fig．4EffectofHey1geneonBMP9-regulatedproliferationofC3H10T1/2cells2．5Hey1基因对BMP9调控的C3H10T1/2细胞周期的影响在上述探讨Hey1基因对BMP9调控的C3H10T1/2细胞增值的影响的基础上，进一步探讨Hey1基因对BMP9调控的C3H10T1/2细胞周期的作用。用LV5-Hey1和LV5-GFP感染C3H10T1/2细胞24h后，加入适当滴度的LV5-BMP9，分别在处理后4、5、6和7d通过流式细胞术检测细胞周期的变化，结果显示，在晚期，单独BMP9组可缩短细胞的G1期从而促进细胞的增殖，而LV5-Hey1使BMP9调控的C3H10T1/2细胞的周期阻滞在G1期(P＜0．05)(图5)。3讨论在BMPs家族成员中BMP2和BMP7因被证实具有明确的诱导成骨分化的作用而应用于临床，课题组17
【参考文献】：
期刊论文
[1]RUNX2对BMP9诱导的间充质干细胞C3H10T1/2成骨分化的影响[J]. 赵艳芳,宋涛,刘跃亮,罗进勇. 中国生物工程杂志. 2013(02)
[2]p38蛋白激酶参与BMP9诱导的C3H10T1/2细胞成骨分化[J]. 徐道晶,王锦,何娟文,胡晶,翁亚光,罗进勇. 中国生物工程杂志. 2011(05)
本文编号：3568920
【文章来源】：中国生物工程杂志. 2015,35(06)北大核心CSCD
【文章页数】：7 页
【部分图文】：
Hey1、BMP9以及GFP的过表达慢病毒包装成功Fig．1TheexpressionofGFP，BMP9andHey1
2015，35(6)唐大刚等:Hey1基因参与调控BMP9诱导的C3H10T1/2细胞成骨分化图2Hey1基因影响BMP9诱导的C3H10T1/2细胞早期成骨分化Fig．2EffectofHey1geneonBMP9-inducedearlyosteogenicdifferentiationofC3H10T1/2cells成骨指标钙盐沉积。结果显示，单独BMP9组可明显诱导钙盐沉积，而LV5-Hey1促进了BMP9诱导的C3H10T1/2细胞晚期成骨分化(图3)。综上所述，Hey1基因可促进BMP9诱导的小鼠C3H10T1/2细胞早晚期成骨分化。2．4Hey1基因对BMP9诱导的C3H10T1/2细胞增殖的影响有研究报道，Hey1基因可影响细胞的增殖［13-14］。在Hey1基因影响BMP9诱导的小鼠C3H10T1/2细胞早晚期成骨分化的基础上进一步探讨Hey1基因对BMP9参与调控的细胞增殖的影响，用LV5-Hey1和LV5-GFP感染C3H10T1/2细胞24h后，加入适当滴度(30%)的LV5-BMP9，分别在处理后24、48和72h用图3Hey1基因影响BMP9诱导的C3H10T1/2细胞晚期成骨分化Fig．3EffectofHey1geneonBMP9-inducedlaterosteogenicdifferentiationofC3H10T1/2cellsMTT方法检测细胞的增值，结果显示，单独BMP9组对细胞的增殖有部分抑制作用，而LV5-Hey1促进了BMP9调控的C3H10T1/2细胞的增殖(P＜0．05)(图4)。图4Hey1基因影响BMP9调控的C3H10T1/2细胞的增殖Fig．4EffectofHey1geneonBMP9-regulatedproliferationofC3H10T1/2cells2．5Hey1基因对BMP9调控的C3H10T1/2细胞周期的影响在上述探讨Hey1基因对BMP9调控的C3H10T1/2细胞增值的影响的基础上，进一步探讨Hey1基因对BMP9调控的C3H10T1/2细胞周期的作用。用LV5-Hey1和LV5-GFP感染C3H10T1/2细胞24h后，加入适当滴度的LV5-BMP9，分别在处理后4、5、6和7d通过流式细胞术检测细胞周期的变化，结果显示，在晚期，单独BMP9组可缩短细胞的G1期从而促进?
＝峁?允荆?ザ繠MP9组可明显诱导钙盐沉积，而LV5-Hey1促进了BMP9诱导的C3H10T1/2细胞晚期成骨分化(图3)。综上所述，Hey1基因可促进BMP9诱导的小鼠C3H10T1/2细胞早晚期成骨分化。2．4Hey1基因对BMP9诱导的C3H10T1/2细胞增殖的影响有研究报道，Hey1基因可影响细胞的增殖［13-14］。在Hey1基因影响BMP9诱导的小鼠C3H10T1/2细胞早晚期成骨分化的基础上进一步探讨Hey1基因对BMP9参与调控的细胞增殖的影响，用LV5-Hey1和LV5-GFP感染C3H10T1/2细胞24h后，加入适当滴度(30%)的LV5-BMP9，分别在处理后24、48和72h用图3Hey1基因影响BMP9诱导的C3H10T1/2细胞晚期成骨分化Fig．3EffectofHey1geneonBMP9-inducedlaterosteogenicdifferentiationofC3H10T1/2cellsMTT方法检测细胞的增值，结果显示，单独BMP9组对细胞的增殖有部分抑制作用，而LV5-Hey1促进了BMP9调控的C3H10T1/2细胞的增殖(P＜0．05)(图4)。图4Hey1基因影响BMP9调控的C3H10T1/2细胞的增殖Fig．4EffectofHey1geneonBMP9-regulatedproliferationofC3H10T1/2cells2．5Hey1基因对BMP9调控的C3H10T1/2细胞周期的影响在上述探讨Hey1基因对BMP9调控的C3H10T1/2细胞增值的影响的基础上，进一步探讨Hey1基因对BMP9调控的C3H10T1/2细胞周期的作用。用LV5-Hey1和LV5-GFP感染C3H10T1/2细胞24h后，加入适当滴度的LV5-BMP9，分别在处理后4、5、6和7d通过流式细胞术检测细胞周期的变化，结果显示，在晚期，单独BMP9组可缩短细胞的G1期从而促进细胞的增殖，而LV5-Hey1使BMP9调控的C3H10T1/2细胞的周期阻滞在G1期(P＜0．05)(图5)。3讨论在BMPs家族成员中BMP2和BMP7因被证实具有明确的诱导成骨分化的作用而应用于临床，课题组17
【参考文献】：
期刊论文
[1]RUNX2对BMP9诱导的间充质干细胞C3H10T1/2成骨分化的影响[J]. 赵艳芳,宋涛,刘跃亮,罗进勇. 中国生物工程杂志. 2013(02)
[2]p38蛋白激酶参与BMP9诱导的C3H10T1/2细胞成骨分化[J]. 徐道晶,王锦,何娟文,胡晶,翁亚光,罗进勇. 中国生物工程杂志. 2011(05)
本文编号：3568920
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