基于ERK1/2通路探讨高压氧对MCAO大鼠大脑皮质损伤的作用及其机制

发布时间：2022-01-05 10:55

　　目的：脑缺血后的梗死边缘区组织供血供氧低下、能量缺失而将导致其中的神经元死亡，为增强边缘区组织的血氧供应，人们试图使用高压氧（Hyperbaricoxygen，HBO）作为一种供氧方案，然而其疗效却存在一定风险，尚有一定争论，并且其具体作用机制还不清楚。本研究通过观察高压氧对大脑中动脉梗阻/再灌注（MCAO/R）大鼠模型的作用，检测大脑皮质梗死边缘区的自噬发生情况，通过分析组织的氧化应激与MAPK信号通路的活化对自噬的调节作用和Mcl-1的表达，探讨高压氧对脑缺血损伤的作用机制。方法：将Wistaar大鼠随机分为假手术组（sham），MCAO模型对照组（MCAO）和高压氧治疗组（HBO）。采用线栓法制作脑缺血模型，造成1.5h缺血后拔出栓线进行再灌注，并经Longa评分达3分者进入实验。HBO组于再灌注3h时给予绝对大气压（ATA）为3.0的纯氧高压并维持1h（不包含之前的10min升压和之后的20min降压），HBO与MCAO组于再灌注24h时处死。大鼠大脑组织冠状切片经红四氮唑（TTC）染色和苏木精-伊红（H&E）染色法分别用于测量大脑梗死面积比和大脑受损情况；取大鼠大脑皮... 

【文章来源】：吉林大学吉林省 211工程院校 985工程院校 教育部直属院校

【文章页数】：55 页

【学位级别】：硕士

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摘要
Abstract
主要英文缩写词表
第1章 绪论
    1.1 脑缺血后梗死边缘区神经细胞损伤的经典机制
        1.1.1 胞内能量衰竭
        1.1.2 兴奋性毒性
        1.1.3 氧化应激
        1.1.4 缺血后炎症
    1.2 自噬与脑缺血边缘区神经元损伤
    1.3 ERK1/2 与脑缺血边缘区神经元损伤
    1.4 高压氧作为一种供氧方案的利与弊
    1.5 展望
第2章 材料与方法
    2.1 试验材料
        2.1.1 实验动物
        2.1.2 实验动物分组
        2.1.3 主要药品与来源
        2.1.4 主要仪器与来源
        2.1.5 主要溶液与配制
    2.2 实验方法
        2.2.1 大鼠 MCAO 模型的制备
        2.2.2 高压氧处理
        2.2.3 ERK1/2 特异性抑制剂 U0126 的使用
        2.2.4 红四氮唑（TTC）染色
        2.2.5 H&E 染色
        2.2.6 Western Blotting
        2.2.7 RT-PCR
    2.3 统计学处理
第3章 实验结果
    3.1 高压氧对 MCAO 大鼠脑组织的作用
        3.1.1 1%TTC 染色测得各组梗死面积比
        3.1.2 H&E 染色观察各组脑皮质形态学变化
    3.2 高压氧对 MCAO 大鼠脑皮质组织自噬的影响
    3.3 高压氧对 MCAO 大鼠脑皮质组织 ERK1/2 表达的影响
    3.4 高压氧对 MCAO 大鼠脑皮质组织抗氧化相关蛋白的影响
    3.5 使用 ERK1/2 抑制剂 U0126 后高压氧对 MCAO 大鼠的作用
        3.5.1 大脑梗死面积变化情况
        3.5.2 脑皮质组织中 ERK1/2 活化情况
        3.5.3 脑皮质组织中自噬水平变化情况
    3.6 高压氧对 MCAO 大鼠脑皮质中 Mcl-1 表达的影响
第4章 讨论
结论
参考文献
作者简介及科研成果
致谢



本文编号：3570224