宁夏地区大肠杆菌临床分离株的耐药性研究

发布时间：2017-05-12 16:05

  本文关键词：宁夏地区大肠杆菌临床分离株的耐药性研究，由笔耕文化传播整理发布。

【摘要】：为了研究宁夏地区大肠杆菌临床分离株的耐药性,本研究对182株大肠杆菌临床分离株采用PCR方法进行了耐药基因的的分子检测；采用纸片扩散法进行了耐药表型的分析；并分析了182株菌株的致病性以及致病性与耐药性的关系、血清型与耐药性的相关性。实验结果如下： 1.根据Genbank报道的参考序列设计磺胺类药物耐药基因：sull、sul2.Sull3:四环素类药物耐药基因：tetA、tetB、tetC、tetD、tetE、tetG;氨基糖苷类药物耐药基因：aadB、 aadD、aadA1、aadA2.aacC2.aacC4.aac(3)-Ia、aac(3)-Ⅱa、aph(3)-Ⅱa；氯霉素类药物耐药基因：CatI、CmlA、Flor;β-内酰胺类药物耐药基因：CTX-M、SHY、OXA、TEM,共25种耐药基因的PCR特异性引物,建立了耐药基因的PCR检测方法,结果表明,耐药基因的阳性株分别扩增出了预期大小的片段,而阴性菌株和空白对照没有扩增出预期大小的片段,且目的条带清晰、特异,说明本实验所建立的PCR检测方法特异、灵敏,可作为大肠杆菌临床分离株耐药基因的检测方法。 2.采用已建立的PCR方法,对以上25种耐药基因进行了分子检测。结果表明,共检测到了17种耐药基因,分别为sull(62.6%)、Sul2(46.7%)、Sul3(1.6%)、tetA(40.1%)、tetB (33.5%)、aadA1(8.2%)、aadA2(8.2%)、aacC2(47.8%)、aacC4(17.0%).aac(3)-Ⅱa (45.1%)、aph(3)-Ⅱa(6.6%).Cat1(16.5%).CmlA(7.1%).Flor(4.9%).CTX-M(20.3%). OXA(12.6%).TEM(54.4%).未检测到tetC、tetD、tetE、tetG、aadB、aadD、aac(3)-Ⅰa、 SHV8种耐药基因。 3.采用CLSI推荐的K-B纸片扩散法对182株大肠杆菌临床分离株进行了五类12种抗菌药物的药敏试验。结果表明,182株菌株对12种抗菌药物表现出不同程度的耐药,耐药率分别为氨苄西林(86.3%)、阿莫西林(85.7%)、四环素(74.7%)、复方新诺明(63.7%)、庆大霉素(52.7%)、头孢噻肟(38.5%)、妥布霉素(29.1%)、卡那霉素(25.3%)、强力霉素(19.2%)、氯霉素(18.7%)、阿米卡星(8.8%)、头孢他啶(8.2%)。182株大肠杆菌临床分离株共有86种耐药谱,且以多重耐药为主,最少的为1耐,最多的可达12耐,5耐菌株数量最多。 4.通过致病性试验分析,182株大肠杆菌临床分离株中有145株致病性大肠杆菌。在145株致病性菌株中,135株菌株检测出有耐药性,致病性大肠杆菌的耐药率为93.1%。在12种抗菌药物中,致病性大肠杆菌对氨苄西林的耐药率最高为87.6%。 5.在本实验室前期对182株大肠杆菌进行血清型鉴定的基础上,本研究对宁夏地区大肠杆菌血清型和耐药性进行了相关性分析,结果表明在01和05型菌株中,69%以上菌株耐氨苄西林、阿莫西林、四环素和复方新诺明；018、0101和0111型菌株中,60%以上耐复方新诺明、氨苄西林、阿莫西林、四环素和庆大霉素；02型菌株中,80%以上耐四环素、氨苄西林和阿莫西林；078型菌株中,54%以上耐氨苄西林、阿莫西林、四环素、复方新诺明和头孢噻肟。
【关键词】：大肠杆菌 耐药性 耐药基因 耐药表型 分子流行病学
【学位授予单位】：宁夏大学
【学位级别】：硕士
【学位授予年份】：2013
【分类号】：R378
【目录】：

• 摘要4-5
• Abstract5-8
• 第一章 文献综述8-16
• 1.1 大肠杆菌病的研究进展8-9
• 1.2 大肠杆菌耐药性的研究进展9-12
• 1.3 大肠杆菌的耐药机理12-13
• 1.4 大肠杆菌血清型与致病性13-14
• 1.5 大肠杆菌致病性与耐药性的关系14
• 1.6 大肠杆菌血清型与耐药性的关系14-16
• 第二章 大肠杆菌临床分离株的致病性分析16-18
• 2.1 材料16
• 2.2 方法16-17
• 2.3 结果与分析17
• 2.4 结论与讨论17-18
• 第三章 大肠杆菌临床分离株主要耐药基因PCR检测方法的建立18-28
• 3.1 材料18-21
• 3.2 方法21-24
• 3.3 结果与分析24-27
• 3.4 结论与讨论27-28
• 第四章 大肠杆菌临床分离株耐药基因的分子检测28-35
• 4.1 材料28-29
• 4.2 方法29-30
• 4.3 结果与分析30-32
• 4.4 结论与讨论32-35
• 第五章 大肠杆菌临床分离株的耐药表型分析35-46
• 5.1 材料35
• 5.2 方法35-37
• 5.3 结果与分析37-44
• 5.4 结论与讨论44-46
• 第六章 结论46-47
• 参考文献47-52
• 致谢52-53
• 附录53-54
• 作者简介54

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