受miRNA-205调控的重组柯萨奇病毒B3的构建及其复制

发布时间：2022-01-24 05:08

　　本研究在柯萨奇病毒B3（coxsackievirus B3,CVB3）基因组P1编码区与P2编码区之间插入一段has-miRNA-205-3p和has-miRNA-205-5p（简称miR-205）的靶序列,得到重组病毒v205T,并比较分析了它在人宫颈癌细胞系HeLa细胞（miR-205低水平表达）和非小细胞肺癌细胞系A549细胞（miR-205高水平表达）中的复制情况。结果表明,插入的miR-205靶序列不影响病毒在HeLa细胞中的复制水平,但抑制了病毒在A549细胞中的复制,病毒滴度为对照的1%以下。为探讨v205T在2株细胞中复制差异的原因,进一步加入miR-205的类似物和抑制物。miR-205类似物可抑制v205T在HeLa细胞中复制和杀伤细胞的水平,而miR-205抑制物可提高v205T在A549细胞中的复制和杀伤细胞的水平。结果表明,v205T的复制确实受miR-205的调控。本研究为开发基于CVB3载体的溶瘤病毒和针对CVB3的减毒活疫苗提供了依据。 

【文章来源】：微生物与感染. 2019,14(04)

【文章页数】：7 页

【文章目录】：
1 材料和方法
    1.1 细胞和培养基
    1.2 CVB3感染性克隆质粒的构建
    1.3 重组病毒的拯救和传代
    1.4 病毒滴度及生长曲线的测定
    1.5 miRNA类似物和抑制物
    1.6 细胞活性分析
    1.7 数据统计分析
2 结果
    2.1 CVB3感染性克隆的构建和重组病毒的获得
    2.2 病毒在HeLa 和A549细胞中的复制
    2.3 miR-205类似物显著降低v205T在HeLa细胞中的复制
    2.4 miR-205抑制物显著增强v205T在A549细胞的复制
3 讨论


【参考文献】：
期刊论文
[1]宫颈癌细胞株HeLa与正常宫颈细胞株Ect1/E6E7的微小RNA表达谱的差异[J]. 邓晰月,洪文旭,吴运妙,段永恒,段山,刘素纯,刘建军.  中国妇幼保健. 2016(01)



本文编号：3605915