Notch信号途径对小鼠树突状细胞抗原提呈功能和Th1/Th2偏转潜能的影响
发布时间：2022-01-24 05:11
树突状细胞（Dendritic cell,DC）是专职抗原提呈细胞,其对免疫系统强有力的调节作用为肿瘤治疗开辟了新的途径。DC疫苗是指负载肿瘤抗原的DC,其能在患者体内诱发抗原特异性的T细胞反应进而杀死肿瘤细胞。在DC的分化和发挥功能过程中,Notch信号途径是必须的。文献报道Notch配体Jagged-1能对DC的分化起抑制作用。而我们利用过表达Notch配体DLL1（Delta-like 1）的OP9基质细胞与野生型小鼠骨髓细胞共培养诱导生成DC,观察DLL1对DC分化和对其负载EL4淋巴瘤抗原后的提呈功能的影响,以期在DC诱导分化过程中,通过调节Notch信号产生更有效的DC肿瘤疫苗。DC通过模式识别受体,如TLR来识别病原体,进而与T细胞发生相互作用并影响T辅助细胞向Th1或Th2极化。具有诱发Th1反应潜能的DC被命名为DC1;而能诱发Th2反应的则被称为DC2。胞内菌感染引发以分泌IFN-γ为特征的Th1反应,而寄生虫感染触发以分泌IL-4、IL-5和IL-13为特征的Th2反应。TLR信号能激活NF-κB途径。多项研究报道Notch信号途径对NF-κB起调控作用。我们前期...
【文章来源】：中国人民解放军空军军医大学陕西省 211工程院校
【文章页数】：66 页
【学位级别】：硕士
【部分图文】：
Notch信号途径受体和配体（引自FreddyRadtke,etal.Immunity,2010）
第四军医大学硕士学位论文受体跨膜区。随后γ分泌酶在S3位点酶切受体跨膜区，释放Notch受体胞内段8。可溶性的胞内段是Notch的活性形式，它能转移入核并结合CSL。转录因子CSL在人类中也被称为CBF-1，在小鼠中为RBP-J，它在未结合胞内段时是转录抑制子，能募集转录共抑制物CoR、组蛋白脱乙酰酶HDAC对基因转录起抑制作用。当与NICD结合后对转录起促进作用。CSL能与DNA特定序列C/TGTGGGAA结合，激活下游基因的表达（如图2）。在多种组织中，基因HES和HEY被证实是Notch靶基因。最近研究也表明还有很多基因受到Notch信号的直接调控。并且，Notch信号途径与其他多种信号途径存在交叉调控，比如NF-κB等，我们可以推测出还有很多受到Notch调控的未知基因。除了上述经典的Notch信号途径外，另一种Notch信号途径为非CBF-1/RBP-Jκ依赖性。近年来，研究表明Notch信号途径还存在其他转导方式9。
体都要依赖 RBP-J 的介导才能激活下游分子，所以剔除 RBP-J 将彻底阻断Notch 信号途径，并排除受体间代偿的可能性。研究发现在条件性剔除 RBP-J的小鼠脾脏中的 cDC 数量明显减少40。我们实验室利用 RBP-J 条件性剔除小鼠模型研究了 Notch 对 DC 发育的影响。研究结果显示：通过全骨髓移植实验，RBP-J 剔除受体小鼠体内脾脏、淋巴结、骨髓和腹腔中的所有 DC 亚群数量明显减少，包括 MHCII+CD11c+；cDC：CD3-CD19-MHCII+CD11c+；pDC：CD3-CD19-CD11b-B220+CD11c+。在体外培养体系中，DC 由骨髓细胞诱导分化而成。DC 经刺激成熟后，形态和功能均表现出缺陷（如图 3）。电镜结果显示 RBP-J 剔除 DC 树突数量减少并变短。RBP-J 剔除后，DC 的抗原提呈和迁移能力下降，其表面分子 MHCⅡ和 CXCR4 的表达量低于对照细胞。而其它表面分子表达情况与对照组没有明显区别，如CD11c、CD86、CD80、Gr1、Mac1 和 CD2441。
【参考文献】：
博士论文
[1]Notch信号途径对小鼠骨髓单核来源树突状细胞和巨噬细胞分化发育的调控[D]. 王耀春.第四军医大学 2009
本文编号：3605921
【文章来源】：中国人民解放军空军军医大学陕西省 211工程院校
【文章页数】：66 页
【学位级别】：硕士
【部分图文】：
Notch信号途径受体和配体（引自FreddyRadtke,etal.Immunity,2010）
第四军医大学硕士学位论文受体跨膜区。随后γ分泌酶在S3位点酶切受体跨膜区，释放Notch受体胞内段8。可溶性的胞内段是Notch的活性形式，它能转移入核并结合CSL。转录因子CSL在人类中也被称为CBF-1，在小鼠中为RBP-J，它在未结合胞内段时是转录抑制子，能募集转录共抑制物CoR、组蛋白脱乙酰酶HDAC对基因转录起抑制作用。当与NICD结合后对转录起促进作用。CSL能与DNA特定序列C/TGTGGGAA结合，激活下游基因的表达（如图2）。在多种组织中，基因HES和HEY被证实是Notch靶基因。最近研究也表明还有很多基因受到Notch信号的直接调控。并且，Notch信号途径与其他多种信号途径存在交叉调控，比如NF-κB等，我们可以推测出还有很多受到Notch调控的未知基因。除了上述经典的Notch信号途径外，另一种Notch信号途径为非CBF-1/RBP-Jκ依赖性。近年来，研究表明Notch信号途径还存在其他转导方式9。
体都要依赖 RBP-J 的介导才能激活下游分子，所以剔除 RBP-J 将彻底阻断Notch 信号途径，并排除受体间代偿的可能性。研究发现在条件性剔除 RBP-J的小鼠脾脏中的 cDC 数量明显减少40。我们实验室利用 RBP-J 条件性剔除小鼠模型研究了 Notch 对 DC 发育的影响。研究结果显示：通过全骨髓移植实验，RBP-J 剔除受体小鼠体内脾脏、淋巴结、骨髓和腹腔中的所有 DC 亚群数量明显减少，包括 MHCII+CD11c+；cDC：CD3-CD19-MHCII+CD11c+；pDC：CD3-CD19-CD11b-B220+CD11c+。在体外培养体系中，DC 由骨髓细胞诱导分化而成。DC 经刺激成熟后，形态和功能均表现出缺陷（如图 3）。电镜结果显示 RBP-J 剔除 DC 树突数量减少并变短。RBP-J 剔除后，DC 的抗原提呈和迁移能力下降，其表面分子 MHCⅡ和 CXCR4 的表达量低于对照细胞。而其它表面分子表达情况与对照组没有明显区别，如CD11c、CD86、CD80、Gr1、Mac1 和 CD2441。
【参考文献】：
博士论文
[1]Notch信号途径对小鼠骨髓单核来源树突状细胞和巨噬细胞分化发育的调控[D]. 王耀春.第四军医大学 2009
本文编号：3605921
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