植物乳杆菌细胞壁肽聚糖缓释微球免疫效果评价

发布时间：2017-05-13 00:13

  本文关键词：植物乳杆菌细胞壁肽聚糖缓释微球免疫效果评价，由笔耕文化传播整理发布。

【摘要】：本课题研究的目的是在实验室前期研究的基础上考察肽聚糖缓释微球的免疫调节作用以及对铜绿假单胞菌感染小鼠的免疫保护效果,为该免疫增强剂的开发与应用提供前期工作基础。利用乳化交联法制备肽聚糖微球,该缓释微球的载药量(46.41±0.829)g/100g,包封率为(82.80±1.74)%。傅立叶红外光谱(FT-IR)分析微球的结构变化结果表明肽聚糖被包埋在壳聚糖微球内部。肽聚糖缓释微球对小鼠免疫效果的评价。200只昆明清洁级小鼠随机分为四组：(1)对照组灌胃0.9%无菌生理盐水0.2mL/只；(2)肽聚糖组灌胃肽聚糖2mg/只；(3)壳聚糖组灌胃壳聚糖空白微球3mg/只；(4)肽聚糖-壳聚糖缓释微球组灌胃肽聚糖-壳聚糖复合微球5mg/只；每隔24h灌胃一次,连续灌胃7d。分别在第3d,7d,14d,21d进行眼球取血,运用流式细胞法测定外周血及脾脏T淋巴细胞亚群；采用间接ELISA测定小鼠外周血中免疫球蛋白IgA、IgG和IgM的动态变化；同时监测小鼠的临床行为和脏器指数。结果显示：肽聚糖缓释微球组免疫器官绝对重量和指数均高于对照组。说明肽聚糖缓释微球能够增强机体对特异性抗原的免疫功能,提高免疫器官的生长功能。经检测小鼠外周血和脾脏T淋巴细胞中CD3+、CD4+、CD3+CD4+结果表明,肽聚糖-壳聚糖缓释微球组与空白组相比有较显著提高。说明肽聚糖微球能够增强机体免疫的能力,提高T淋巴细胞亚群的数量。肽聚糖-壳聚糖复合微球组在第14d时小鼠IgG含量有明显提高,在第21d时变化显著(p0.01)。肽聚糖微球组在第21d,28d感染铜绿假单胞菌时,存活率分别为50%,60%,与空白组相比有显著差异。本课题研究将为口服肽聚糖的理化性质及生理活性提供理论依据,对肽聚糖作为免疫增强剂的研究与开发具有重要意义。
【关键词】：肽聚糖微球 免疫 保护效果
【学位授予单位】：黑龙江大学
【学位级别】：硕士
【学位授予年份】：2013
【分类号】：R392
【目录】：

• 中文摘要3-4
• Abstract4-9
• 第1章 前言9-19
• 1.1 植物乳杆菌简介9-11
• 1.1.1 植物乳杆菌及其代谢产物的生理功能9-10
• 1.1.2 免疫调节作用10
• 1.1.3 降低血清胆固醇含量及预防心血管疾病10-11
• 1.1.4 对致病菌的拮抗作用11
• 1.2 肽聚糖作为免疫增强剂的研究现状11-16
• 1.2.1 肽聚糖免疫识别蛋白研究进展12-14
• 1.2.2 肽聚糖作为免疫增强剂的研究进展14-15
• 1.2.3 肽聚糖的应用前景与展望15-16
• 1.3 开发肽聚糖缓释制剂的必要性16-17
• 1.4 本实验室的前期研究工作基础17
• 1.5 本课题研究的目的意义17-19
• 第2章 植物乳杆菌细胞壁肽聚糖微球的研制19-25
• 2.1 实验材料19-20
• 2.1.1 菌种19
• 2.1.2 培养基19
• 2.1.3 实验试剂19
• 2.1.4 实验仪器19-20
• 2.2 肽聚糖-壳聚糖缓释微球制备方法20
• 2.3 肽聚糖-壳聚糖缓释微球结构表征及物理性能检测20-21
• 2.3.1 缓释微球扫描电镜观察20
• 2.3.2 红外光谱分析(FTIR)20
• 2.3.3 肽聚糖-壳聚糖缓释微球载药量和包封率检测20-21
• 2.4 结果与讨论21-24
• 2.4.1 扫描电镜观察微球形态21-22
• 2.4.2 傅立叶红外光谱分析(FTIR)22-23
• 2.4.3 载药量包封率23-24
• 2.5 本章小结24-25
• 第3章 肽聚糖-壳聚糖缓释微球对小鼠免疫功能的影响25-49
• 3.1 实验材料25-26
• 3.1.1 实验动物25
• 3.1.2 实验材料及试剂25
• 3.1.3 实验仪器和设备25-26
• 3.2 试验方法26-27
• 3.2.1 动物分组及饲养管理26
• 3.2.2 小鼠免疫器官重量的测定26
• 3.2.3 外周血T淋巴细胞亚群的测定26
• 3.2.4 脾脏T淋巴细胞亚群的测定26-27
• 3.2.5 小鼠免疫球蛋白IgA、IgG、IgM的测定27
• 3.2.6 数据处理27
• 3.3 结果与分析27-46
• 3.3.1 小鼠免疫器官重量的测定27-31
• 3.3.2 外周血T淋巴细胞亚群的测定31-38
• 3.3.3 脾脏T淋巴细胞亚群的测定38-44
• 3.3.4 小鼠免疫球蛋白IgA、IgG、IgM的测定44-46
• 3.4 讨论46-49
• 3.4.1 小鼠免疫器官重量的测定46-47
• 3.4.2 T淋巴细胞亚群的测定47-48
• 3.4.3 小鼠免疫球蛋白IgA、IgG、IgM的测定48-49
• 第4章 肽聚糖-壳聚糖缓释微球对铜绿假单胞菌感染小鼠的保护效果研究49-56
• 4.1 实验材料49
• 4.1.1 实验动物49
• 4.1.2 实验材料及试剂49
• 4.1.3 实验仪器和设备49
• 4.2 试验方法49-50
• 4.2.1 环磷酰胺致小鼠免疫低下模型的建立49-50
• 4.2.2 缓释微球对感染铜绿假单胞菌小鼠免疫保护效果评价50
• 4.3 实验结果与讨论50-54
• 4.3.1 环磷酰胺致小鼠免疫低下模型的建立50-51
• 4.3.2 不同时间给予铜绿假单胞菌后小鼠存活率的比较51-54
• 4.4 本章小结54-56
• 第5章 结论56-57
• 第6章 本论文的主要创新点及展望57-58
• 6.1 创新点57
• 6.2 展望57-58
• 参考文献58-66
• 致谢66-67
• 攻读学位期间发表的学术论文67-68

【参考文献】

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本文编号：361182