耐甲氧西林金黄色葡萄球菌SCCmec基因分型检测与耐药性分析
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【摘要】:目的:(1)初步了解新疆医科大学第一附属医院临床分离的耐甲氧西林金黄色葡萄球菌(MRSA)对临床常用抗菌药物的敏感性。(2)检测新疆医科大学第一附属医院临床分离的MRSA SCCmec基因型并分析其同源性。(3)检测该院临床分离的MRSA PVL基因和TSST-1基因的携带情况。方法:收集新疆医科大学第一附属医院检验科MRSA标本,(1)采用聚合酶链反应的方法(PCR)对MRSA进行基因型鉴定,采用Kerby-Bauer纸片扩散法检测MRSA对12种常用抗菌药物的敏感性。(2)用多重聚合酶链反应的方法检测MRSASCCmec基因型,采用随机扩增多态DNA分析(RAPD)技术对MRSA进行同源性分析。(3)采用PCR方法检测MRSA PVL基因和TSST-1基因的携带情况。结果:(1)49株MRSAmecA基因及femB基因均100%阳性,49株MRSA对青霉素G和苯唑西林均100%耐药,对利福平、阿奇霉素、红霉素、阿米卡星、庆大霉素、左氧氟沙星、克林霉素和环丙沙星的耐药率分别为95.92%、77.55%、77.55%、89.80%、85.71%、83.67%、67.35%和89.80%;对呋喃妥因耐药率仅为2.04%,未发现对万古霉素耐药的菌株。(2)49株MRSA的SCCmec基因型分型情况为:SCCmecⅡ型32株(65.31%),SCCmecⅢ型10株(20.41%),SCCmecⅣa型4株(8.16%),未分型3株(6.12%)。其中以SCCmecⅡ型菌株最多。RAPD根据电泳图中条带数和位置的不同,经过NTSYS2.10e分析可以将49株MRSA分成3个主要基因型。(3)49株MRSA通过PCR法检测到PVL基因及TSST-1基因的携带率分别是:63.27%和36.73%。结论:新疆医科大学第一附属医院MRSA耐药性严重,呈多重耐药,对常用抗菌药物β-内酰胺类、喹诺酮类等耐药率较高,呋喃妥因、万古霉素是治疗本院MRSA感染的有效药物;本院MRSASCCmec基因型以SCCmecⅡ型为主,与国内大部分报道不同;携带PVL基因的MRSA共31株,,检出率为63.27%,携带TSST-1基因的MRSA共18株,检出率为36.73%,与国内其他地区、医院报道相比,新疆医科大学第一附属医院MRSA PVL基因和TSST-1基因携带率均较高。综上所述,我院应该加强医院感染控制,防治其播散流行。
【关键词】:耐甲氧西林金黄色葡萄球菌 多重聚合酶链反应 葡萄球菌mec盒式染色体 杀白细胞素 随即扩增多态性DNA
【学位授予单位】:新疆医科大学
【学位级别】:硕士
【学位授予年份】:2013
【分类号】:R3416
【目录】:
- 摘要7-8
- Abstract8-10
- 前言10-13
- 材料与方法13-27
- 1. 材料13-16
- 1.1 研究对象13
- 1.2 主要仪器设备13
- 1.3 主要试剂13-15
- 1.4 引物15-16
- 2. 方法16-27
- 2.1 菌株的表型鉴定16-17
- 2.2 MRSA 基因型鉴定17-19
- 2.3 药敏试验19-21
- 2.4 SCCmec 基因型检测21-23
- 2.5 RAPD 聚类分析23-24
- 2.6 PVL 基因检测24-25
- 2.7 TSST-1 基因检测25-27
- 结果27-37
- 讨论37-46
- 小结46-47
- 致谢47-48
- 参考文献48-55
- 综述55-64
- 参考文献60-64
- 攻读硕士学位期间发表的学位论文64-65
- 导师评阅表65
【参考文献】
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本文编号:361694
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