c-Abl基因在小鼠消化道稳态中的作用

发布时间：2017-05-14 02:08

  本文关键词：c-Abl基因在小鼠消化道稳态中的作用，由笔耕文化传播整理发布。

【摘要】：甲磺酸伊马替尼（Imatinib Mesylate，STI571或Gleevec）是临床上常用的一种治疗慢性粒细胞白血病的药物，它还可以用于治疗其它一些癌症，如胃肠道间质瘤、结肠直肠癌、人上皮乳腺癌等。它主要的靶基因是c-Abl、c-Kit和血小板生长因子受体（PDGFR）基因。本文对正常小鼠腹腔注射Imatinib Mesylate进行研究，发现小鼠的食管、胃和大肠的肌肉层发生病理学改变，从而揭示了这种药物的一种不良影响。c-Abl~(-/-)的小鼠消化道尤其是肌肉层部位也出现相似的表型缺陷，这说明ImatinibMesylate通过影响c-Abl从而影响消化道稳态。另外，我们发现c-Abl~(-/-)小鼠在年老时有巨食管和直肠脱垂的表型，于是我们又研究衰老相关基因p16~(Ink4A)缺失后对c-Abl~(-/-)小鼠表型的影响，结果发现p16~(Ink4A)的缺失挽救了c-Abl~(-/-)小鼠的出生后的高死亡率和生殖缺陷，但对直肠脱垂只有微小的影响，对巨食管表型没有影响，这说明p16~(Ink4A)介导的衰老过程几乎和巨食管与直肠脱垂无关。我们还发现c-Abl~(-/-)小鼠中血纤维蛋白溶酶原系统被抑制，因此我们推断巨食管的发病机理可能与血纤维蛋白溶酶原系统有关。以上结果表明c-Abl~(-/-)小鼠为研究巨食管和直肠脱垂发病机理提供了一种有力的模型，临床上病人使用Imatinib Mesylate后可能会引起肠胃问题，这点应该引起重视。
【关键词】：c-Abl Imatinib Mesylate 巨食管 直肠脱垂 消化道
【学位授予单位】：上海交通大学
【学位级别】：硕士
【学位授予年份】：2013
【分类号】：R363
【目录】：

• 摘要3-4
• ABSTRACT4-8
• 第一章 绪论8-28
• 1.1 引言8
• 1.2 消化道的结构和功能8-11
• 1.2.1 食管10
• 1.2.2 胃10
• 1.2.3 肠10-11
• 1.3 消化道疾病11-15
• 1.3.1 巨食管11-12
• 1.3.2 巴雷特食管12
• 1.3.3 克罗恩病12-13
• 1.3.4 直肠脱垂13-15
• 1.4 c-Abl 基因与 Imatinib Mesylate15-25
• 1.4.1 c-Abl 基因的结构和分布15-16
• 1.4.2 c-Abl 的功能和信号转导16-22
• 1.4.3 Imatinib Mesylate 与 c-Abl22-25
• 1.5 纤溶系统的组成和功能25-27
• 1.6 p16~(Ink4A)的功能27-28
• 第二章 实验材料和方法28-45
• 2.1 实验动物小鼠准备28
• 2.2 小鼠基因型鉴定28-31
• 2.2.1 小鼠尾部 DNA 的提取28-29
• 2.2.2 PCR 筛选 c-Abl~(-/-)小鼠以及 c-Abl~(-/-)p16~(Ink4A)~(-/-)小鼠29-30
• 2.2.3 琼脂糖凝胶电泳检测30-31
• 2.3 组织准备和形态学分析31-32
• 2.3.1 组织准备和组织切片31
• 2.3.2 苏木素-伊红染色（HE 染色）31-32
• 2.3.3 免疫荧光染色32
• 2.4 给小鼠注射 Imatinib Mesylate 药物并进行形态学和 western blotting 分析32-37
• 2.4.1 小鼠的腹腔药物注射32-33
• 2.4.2 组织学分析33
• 2.4.3 小鼠食管组织的 western blotting33-37
• 2.5 RNA 提取，表达谱芯片分析和实时荧光定量 PCR37-42
• 2.5.1 RNA 的提取和检测37-38
• 2.5.2 基因表达谱芯片分析38-41
• 2.5.3 cDNA 第一条链的合成和实时荧光定量 PCR41-42
• 2.6 细胞的培养与 western blot42-44
• 2.6.1 MEF 细胞的分离42-43
• 2.6.2 MEF 细胞的传代43
• 2.6.3 western blotting43-44
• 2.7 统计分析44-45
• 第三章 实验结果45-59
• 3.1 给小鼠注射 matinib mesylate 后引起消化道缺陷45-47
• 3.2 PCR 筛选得到 c-Abl~(-/-)和 c-Abl~(-/-)p16~(Ink4A)~(-/-)小鼠47
• 3.3 c-Abl~(-/-)小鼠在年老时表现出食管缺陷，逐渐发展为巨食管47-52
• 3.4 c-Abl~(-/-)小鼠胃、小肠和直肠的肌层发生缺陷52-54
• 3.5 c-Abl-/-小鼠在年老时表现出直肠脱垂54-56
• 3.6 p16~(Ink4A)在直肠脱垂发生过程中的作用56-59
• 第四章 讨论59-62
• 4.1 Imatinib Mesylate 对小鼠消化道的影响59
• 4.2 c-Abl 与消化道发育59-60
• 4.3 c-Abl 与相关基因的联系60-62
• 第五章 总结和展望62-63
• 参考文献63-68
• 附录Ⅰ 实验仪器与设备68-69
• 附录Ⅱ 实验试剂69-70
• 附录Ⅲ 实验主要溶液及其配制70-72
• 附录Ⅳ 缩写及符号72-74
• 致谢74-76

【共引文献】

中国期刊全文数据库 前1条

1 滕建英;任园园;徐少骏;郭瑞;郭健;吴佳佳;朱金土;倪有娣;;血竭负载人工真皮支架对猪Ⅲ°烧伤创面修复中VEGF表达及创面收缩的影响[J];健康研究;2013年06期

中国博士学位论文全文数据库 前1条

1 徐益苗;热休克蛋白27及其磷酸化对p53的调控及介导MCF-7细胞多柔比星耐受的研究[D];南京师范大学;2013年

中国硕士学位论文全文数据库 前2条

1 姜开菊;Wnt家族基因Wnt4-like以及FLNα在荒漠沙蜥皮肤中的原位表达研究[D];兰州大学;2013年

2 黄映雪;Fyn在神经元迁移中的作用[D];西北农林科技大学;2013年

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本文编号：364106