BDNF在大鼠胚胎脊髓发育中与Wnt信号通路的关系研究

发布时间：2017-05-14 15:15

  本文关键词：BDNF在大鼠胚胎脊髓发育中与Wnt信号通路的关系研究，由笔耕文化传播整理发布。

【摘要】：[目的] 探讨BDNF对体外培养的SD大鼠胚胎脊髓神经元、神经干细胞生长的影响,并探讨其与Wnt信号通路的关系。进一步阐明BDNF促进脊髓发育的机制,为临床治疗神经系统疾病提供重要依据。 [方法] 原代培养SD大鼠胚胎脊髓神经元和神经干细胞,并对其鉴定；BDNF过表达及干扰的单纯疱疹病毒(HSV)重组体转染原代培养SD大鼠胚胎脊髓神经元和神经干细胞(均分为正常组、对照组、BDNF过表达组和BDNF低表达组),分别于转染24、48和72小时计数各组神经元数量、胞体面积、突起长度(神经球数量、神经球面积、分化率),MTT检测神经元和神经干细胞的活力,Real timePCR检测Wnt信号通路相关因子的mRNA表达量,探讨BDNF对SD大鼠胚胎脊髓神经元和神经干细胞生长的影响,并探讨其与Wnt信号通路的关系。 [结果] 培养SD大鼠胚胎脊髓神经元和神经干细胞,并进行鉴定。转染培养的SD大鼠胚胎脊髓神经元和神经干细胞。 1、BDNF对神经元生长发育的影响： (1)转染24h,各组神经元数量、胞体面积、最长突起长度和细胞活力比较,均没有统计学意义(P0.05)。 (2)转染48h, BDNF过表达组与对照组比较,神经元数量显著增加,神经元活力显著增高,差异有统计学意义(P0.01)；而BDNF低表达组与对照组比较,神经元数量显著减少,差异有统计学意义(P0.01),最长突起长度显著减少,神经元活力明显减低,差异有统计学意义(P0.05)；各组神经元胞体面积比较均无明显变化,差异无统计学意义.(P0.05)。 (3)转染72h,镜下见一片荒芜,已无法统计。 2、BDNF对神经干细胞生长发育的影响： (1)转染24h,各组神经球数量、球面积、分化率和细胞活力比较,均无统计学意义(P0.05)。 (2)转染48h,BDNF过表达组与对照组比较,神经球面积增大,细胞活力增高,差异有统计学意义(P0.05),神经球数量和分化率没有变化(P0.05)；而BDNF低表达组与对照组比较,神经球数量减少,神经球面积减小,分化率降低,差异有统计学意义(P0.05),细胞活力没有变化(P0.05)。 (3)转染72h,BDNF低表达组与对照组比较,神经球数量减少,分化率降低,差异有统计学意义(P0.05)；各组神经球面积、神经干细胞活力比较,差异均无统计学意义(P0.05)。 3、BDNF与Wnnt信号通路的关系： (1)神经元Real timePCR检测结果： BDNF过表达组与对照组比较,GSK-3β的表达明显减少(P0.01),cyclinDl的表达显著增加(P0.01),而BDNF低表达组与对照组比较,GSK-3β的表达明显增加(P0.01), cyclinDl的表达显著减少(P0.01),Wnt信号通路的其他因子各组比较无明显差异(P0.05)。 (2)神经干细胞Real timePCR检测结果： BDNF过表达组与对照组比较,GSK-3β的表达明显减少(P0.01),cyclinDl的表达显著增加(P0.01),而BDNF低表达组与对照组比较,GSK-3β的表达明显增加(P0.01), cyclinDl的表达显著减少(P0.05), Wnt信号通路的其他因子各组比较均无差异(P0.05)。 [结论] 1、BDNF促进大鼠胚胎脊髓神经元存活、轴突生长。2、BDNF促进大鼠胚胎脊髓神经干细胞的增殖、分化。 3、BDNF可能是通过抑制Wnt信号通路中GSK-3β的表达,刺激核内靶基因cyclinDl转录,进而促胚胎脊髓的生长、发育。
【关键词】：BDNF 脊髓 神经元 神经干细胞 Wnt
【学位授予单位】：昆明医科大学
【学位级别】：硕士
【学位授予年份】：2013
【分类号】：R338
【目录】：

• 中文摘要5-7
• Abstract7-11
• 前言11-14
• 第一部分 SD大鼠胚胎脊髓神经元和神经干细胞的体外培养及鉴定14-28
• 材料与方法14-24
• 实验结果24-28
• 第二部分 BDNF对SD大鼠胚胎脊髓发育的影响及其与Wnt信号通路的关系初探28-68
• 材料与方法28-46
• 实验结果46-68
• 讨论68-72
• 结论72
• 参考文献72-77
• 综述77-85
• 参考文献81-85
• 读硕士学位期间的主要成果85-86
• 致谢86

【参考文献】

中国期刊全文数据库 前6条

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本文编号：365522