乙型流感病毒Vero细胞冷适应株传代适应性及其基因研究

发布时间：2017-05-17 05:04

  本文关键词：乙型流感病毒Vero细胞冷适应株传代适应性及其基因研究，由笔耕文化传播整理发布。

【摘要】：流感病毒是一种能引起急性呼吸道疾病的病毒,具有高度的传染性,主要经空气飞沫传播,它能在短期内突然发生、迅速蔓延,而且不时会出现流感大流行或局部暴发流行,目前虽然少数抗病毒药物有一定的治疗效果,但流行性感冒仍然是人类尚不能有效控制的传染病之一。接种流感疫苗是预防流感和控制流感流行最经济而且行之有效的方法。乙型流行性感冒病毒一般不引起世界范围内的大流行,但是它能够引起地区性、季节性的流行,严重威胁人类的健康和生命,造成重大经济损失,因此其是季节性流感疫苗的重要组成成份。流感病毒减毒活疫苗滴鼻免疫,病毒可在上呼吸道复制,能诱导粘膜免疫、体液免疫及细胞免疫反应,且保护作用更持久；对表面抗原发生漂变的流行株病毒有一定的交叉保护作用。目前国外制备流感减毒活疫苗是以鸡胚作为基质生产,存在很多缺陷与局限性,用哺乳动物细胞体外培养病毒制备流感疫苗易于标准化生产和外源因子控制。Vero细胞是WHO推荐用于生产人用生物制品的细胞基质,培养出的流感病毒较鸡胚培养的病毒变异小,可采用发酵罐大规模制备疫苗,实现规模化生产,在应对流感大流行时尤其重要。目前还没有商品化的Vero细胞流感减毒疫苗。 本试验在乙型流感病毒Vero细胞冷适应株B/Yunnan/23/2011ca的基础上,优化培养条件,在25℃传35代后获得了一株具有温度敏感性(ts)、冷适应性[ca]的乙型流感病毒Vero细胞冷适应株B/Yunnan/23/2011ca P35,25℃培养血凝效价维持在1：512。对其HA、NA、M1、NS、NP基因进行分析后发现在25℃传代后编码病毒的抗原蛋白HA、NA的基因未发生有义突变,而在M1、NS、NP基因上发现几个编码氨基酸的基因变异,为采用比较基因组学和反向遗传学技术阐述流感病毒冷适应性、温度敏感性的机制打下了基础。
【关键词】：乙型流感病毒 Vero细胞 ts特征 ca特征 基因
【学位授予单位】：昆明医科大学
【学位级别】：硕士
【学位授予年份】：2013
【分类号】：R373.13
【目录】：

• 摘要5-6
• ABSTRACT6-7
• 第一部分 乙型流感病毒Vero细胞冷适应株传代适应性研究7-31
• 前言7-9
• 一 实验材料9
• 二 主要试剂和器材9-10
• 三 实验方法10-12
• 四 结果和分析12-26
• 五 讨论26-28
• 六 小结28
• 参考文献28-31
• 第二部分 乙型流感病毒Vero细胞冷适应株的基因分析31-53
• 前言31-32
• 一 实验材料32-33
• 二 主要试剂和器材33
• 三 实验方法33-38
• 四 结果和分析38-49
• 五 讨论49-51
• 六 小结51
• 参考文献51-53
• 论文综述53-62
• 参考文献59-62
• 附录62-83
• 个人简历83-84
• 致谢84

【参考文献】

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  本文关键词：乙型流感病毒Vero细胞冷适应株传代适应性及其基因研究，由笔耕文化传播整理发布。

本文编号：372568