大鼠新生期脂多糖暴露对睾丸发育的影响

发布时间：2017-05-17 05:04

  本文关键词：大鼠新生期脂多糖暴露对睾丸发育的影响，由笔耕文化传播整理发布。

【摘要】：目的 观察大鼠新生期脂多糖(LPS)暴露对睾丸发育的影响，探讨新生期内毒素血症对雄性生殖的潜在危害。 方法 选用新生健康雄性SD大鼠，随机分为对照组和实验组，实验组于生后第4～12d期间，隔日腹腔注射脂多糖(75μg/kg，溶于生理盐水中)，共5次，复制内毒素损伤模型，对照组在相同时间腹腔注射等体积生理盐水。两组注射后均常规饲养至生后21d、PSd (preputial separation day,包皮分离日)、60d、77d称取体重后，分批处死，摘取双侧睾丸，睾丸称重后，常规石蜡包埋，连续切片，分别行HE染色和免疫组化染色，光镜观察睾丸组织病理变化及增殖细胞核抗原(proliferating cell nuclear antigen, PCNA)、诱导型一氧化氮合酶(inducible nitricoxide synthase, iNOS)和波形蛋白(vimentin, Vim)的表达分布情况。 结果 1.两组各日龄大鼠的体重、睾丸重量、睾丸脏器系数及睾丸体积随日龄增加而增加。包皮分离日实验组大鼠的睾丸重量，睾丸最大纵、横径，睾丸脏器系数以及睾丸体积与同龄对照组相比，均下降，差异有显著性(P0.05)；60日龄实验组大鼠睾丸最大纵径变小，与同龄对照组相比，差异有显著性(P0.05)。 2. HE染色结果：对照组大鼠的生精小管分布均匀，生精上皮规则，各级生精细胞排列整齐，60日龄及77日龄大鼠管腔中可以见到大量精子。两组大鼠的生精小管直径随日龄增加而增加。与同日龄对照组大鼠的生精小管直径相比，实验组大鼠的生精小管直径变小。实验组可见生精上皮脱落、变薄，生精细胞排列紊乱，严重者生精小管被大量脱落的生精细胞团填塞。 3.免疫组化检测结果：（1）对照组波形蛋白染色阳性反应从生精小管基膜围绕支持细胞核形成棕黄色的环,并呈辐射状延伸至管腔；实验组的波形蛋白表达减少或消失，伸至管腔的微丝明显变短。（2）增殖细胞核抗原(PCNA)阳性细胞主要是精原细胞和初级精母细胞，阳性产物位于细胞核，呈棕黄色、颗粒状；实验组在上述部位的表达量减少。（3）诱导型一氧化氮合酶(iNOS)阳性反应见于支持细胞、睾丸间质细胞、管周肌样细胞，实验组在支持细胞和管周肌样细胞表达明显增强。 结论 1.大鼠新生期脂多糖暴露可改变支持细胞波形蛋白的表达和分布，破坏支持细胞的骨架结构，导致生精细胞脱落进而损害生精过程，这种损害作用可延续至成年期。 2.大鼠新生期脂多糖暴露可致睾丸组织内iNOS表达增加、PCNA表达减少，推测iNOS表达增加，所致的NO产生过多，，可能是脂多糖暴露导致支持细胞骨架结构破坏，造成生精细胞脱落和生精细胞增殖分化障碍的机制之一。
【关键词】：新生大鼠 脂多糖 睾丸 iNOS 波形蛋白 PCNA
【学位授予单位】：南华大学
【学位级别】：硕士
【学位授予年份】：2013
【分类号】：R321.1
【目录】：

• 英文缩略词表4-5
• 中文摘要5-7
• ABSTRACT7-10
• 前言10-13
• 材料和方法13-17
• 1. 材料13-14
• 1.1 试剂13
• 1.2 主要仪器13
• 1.3 实验动物及动物模型制作13-14
• 2. 方法14-16
• 2.1 大鼠体重、睾丸重量、睾丸纵、横径、睾丸脏器系数及睾丸体积的测定和计算14
• 2.2 切片的制备14
• 2.3 HE 染色14-15
• 2.4 免疫组化染色15-16
• 3. 数据处理16-17
• 结果17-18
• 1. 大鼠体重、睾丸重量、睾丸最大纵、横径、睾丸脏器系及睾丸体积变化17
• 2. 大鼠睾丸的 HE 染色结果17
• 3. 波形蛋白、PCNA、iNOS 免疫组化检测17-18
• 3.1 波形蛋白17
• 3.2 增殖细胞核抗原(PCNA)17
• 3.3 诱导型一氧化氮合酶(iNOS)17-18
• 讨论18-21
• 1. 新生期脂多糖暴露对大鼠体重、睾丸重量、睾丸脏器系数及睾丸体积的影响18
• 2. 新生期脂多糖暴露对大鼠睾丸组织学结构及睾丸发育的影响18
• 3. LPS 对睾丸 PCNA、波形蛋白及 iNOS 表达的影响18-21
• 结论21-22
• 参考文献22-26
• 附表与图26-32
• 综述32-39
• 参考文献36-39
• 攻读硕士学位期间发表的论文39-40
• 致谢40

【参考文献】

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本文编号：372573