小鼠脂肪来源干细胞的分离、培养及鉴定

发布时间：2017-05-19 08:26

  本文关键词：小鼠脂肪来源干细胞的分离、培养及鉴定，由笔耕文化传播整理发布。

【摘要】：脂肪来源干细胞（Adipose-DerivedStemCells,ADSCs)作为组织工程的种子细胞正受到越来越多的关注。 本实验采用一次消化多次收集与差速贴壁法分离小鼠腹股沟及附睾脂肪组织中的ADSC。通过倒置显微镜观察ADSC的一般形态；透射电子显微镜观察ADSC的超微结构；流式细胞术及激光共聚焦显微镜检测ADSC表面标志；利用特定的诱导液诱导ADSC分化及利用扫描电子显微镜观察ADSC与胶原支架的相容性。 结果显示ADSC呈长梭形或成纤维细胞样，旋涡状或束状交叉生长。ADSC细胞体积大，胞质内含有线粒体及粗面内质网等细胞器。ADSC的生长符合干细胞的生长规律，并可在体外稳定传至第9代。ADSC表达CD44及CD29，不表达CD34。成骨诱导剂诱导后，细胞内碱性磷酸酶表达量增加，，细胞基质发生钙化。成脂肪诱导剂诱导后，细胞质内可见较多小脂滴。说明ADSC具有分化为成骨细胞及脂肪细胞的潜能。ADSC能够在胶原支架上铺展生长，说明其与胶原支架具有良好的相容性。 本实验建立了分离、培养小鼠ADSC的技术方法，为将来利用小鼠ADSC进行皮肤、肌腱、血管及神经组织修复的动物实验研究提供了前期实验基础和技术支持。
【关键词】：小鼠 脂肪组织 干细胞
【学位授予单位】：吉林大学
【学位级别】：硕士
【学位授予年份】：2013
【分类号】：R329.2
【目录】：

• 内容提要4-6
• 英文缩略词表6-7
• 第1章 综述7-13
• 1、ADSC的统一命名8-9
• 2、ADSC的来源9
• 3、ADSC的分离、培养9-10
• 4、ADSC的表面标志10
• 5、ADSC的分化潜能10-11
• 6. 展望11-13
• 第2章 材料与方法13-23
• 2.1 主要试剂及仪器13-14
• 2.2 实验动物14-15
• 2.3 实验方法15-23
• 第3章 实验结果23-30
• 3.1 ADSC的形态学观察23-24
• 3.2 ADSC的超微结构特点24-25
• 3.3 ADSC的生长动力学25
• 3.4 ADSC的生物学标志检测25-27
• 3.5 ADSC的成脂肪分化27-28
• 3.6 ADSC的成骨分化28-29
• 3.7 ADSC与胶原支架材料的相容性29-30
• 第4章 讨论30-33
• 第5章 结论33-34
• 参考文献34-41
• 中文摘要41-43
• Abstract43-46
• 作者简介及科研成果46-47
• 致谢47

【参考文献】

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本文编号：378217