十二指肠—空肠套管大鼠模型的建立及对高脂饮食诱导的肥胖伴高胰岛素血症大鼠影响的研究

发布时间：2017-05-24 06:13

  本文关键词：十二指肠—空肠套管大鼠模型的建立及对高脂饮食诱导的肥胖伴高胰岛素血症大鼠影响的研究，由笔耕文化传播整理发布。

【摘要】：研究背景 目前，全球范围内的肥胖患者数量迅猛增长，已成为全球健康的重大威胁。肥胖不仅影响人类生活质量而且会引起多种疾病，如2型糖尿病、呼吸睡眠暂停综合征等。但内科药物治疗难以维持长期疗效，所以减重手术已成为治疗肥胖最有效的方法之一。随着手术的发展，有研究证实经过减重手术治疗的肥胖合并2型糖尿病的患者不仅体重减轻很明显，而且糖尿病的症状也有大幅改善。最近，有很多研究表明，减重手术能够治疗2型糖尿病的原因与胃肠激素的分泌改变有密切关联，但其中的机制仍不清楚。 减重手术发展至今，针对肥胖和糖尿病的治疗已经开展了多种术式。然而，这些手术措施大多都具有高侵袭性、不可逆性，也会带来非常大的风险。其中最为常见的术式是Roux-en-Y胃旁路术（RYGB），它需要切除部分胃以及旷置全部十二指肠和上段空肠。为了减少手术的高侵袭性，Luca Milone等首次在猪的体内尝试一种全新减重方法：模拟RYGB原理，在猪的十二指肠和空肠上段之间置入一段不通透的柔软聚乙烯薄膜管置入，以此隔离食物和营养物质与肠粘膜和肠液的接触，达到吸收不良减轻体重的效果。随后国外还有不少与此类似的报道，但还未查到国内与此相关的文献报道。因此本实验通过查阅文献和逐渐摸索、改进，最后将薄膜管材料由聚乙烯薄改进成为硅橡胶，经开腹后用导尿管逆行性牵引的方法将其置于十二指肠-上段空肠之间，建立了十二指肠-空肠内套管的动物模型。初步观察套管术在短期内的安全性以及管长区别对体重、摄食量、空腹血胰岛素、游离脂肪酸、GLP-1以及甘油三酯的的影响。初步讨论该手术可能参与的减重及减轻高胰岛素血症的原因，为以后的研究做出相关铺垫。 目的在高脂诱导至肥胖合并高胰岛素血症大鼠的十二指肠-上段空肠内置入由硅橡胶制成的薄膜管，通过对比术前与术后大鼠小肠组织HE染色有无变化来观察置管后的短期安全性以及减重效果。分析术后空腹胰岛素、游离脂肪酸、GLP-1和甘油三酯的变化，初步讨论该手术中因套管长短的不同对于减重及减轻高胰岛素血症的潜在区别与原因。 方法 首先将20只SD雄性大鼠（初始体重180-210g）,高脂饲料喂养8周建立高胰岛素血症大鼠模型。8周后成膜的大鼠体重增至约523.5±29.55g左右，将其随机分为2组，每组10只，行肠内置管术。术前大鼠体重经方差齐性检验，显示为齐性数据。分组的标准由置管长度决定。分别为手术组（DJES-30cm）和对照组（DJES-3cm）。剔除掉术后死亡的4只大鼠，剩下每组各8只大鼠。记录术前和术后1、2、4、6周各项指标的变化：包括体重、摄食量、空腹胰岛素、空腹游离脂肪酸、空腹GLP-1、空腹甘油三酯和粪便情况，并对小肠组织行病理学观察。 结果 1.体重：术后2组大鼠体重在1周时均下降。手术组体重与术前相比显著下降（P0.01，n=8）。考虑与手术创伤及术后一周内摄食量急剧下降有关。之后体重缓慢回升。术后6周与较术前仍低，但无统计学差异（P0.05，n=8）。对照组大鼠体重在6周时与术前和手术组相比均显著升高（P0.01，n=8）； 2.摄食量：术前-术后1周手术组大鼠的摄食量较术前和对照组相比均显著下降（P0.001，P0.01，n=8）。至术后6周，手术组的摄食量与术前和对照组相比仍明显下降（P0.05，n=8）； 3. FFA：手术组FFA从术后就呈下降趋势，到术后4周与术前和对照组相比均明显下降（P0.05，n=8），至术后6周与对照组相下降更为明显（P0.01，n=8）； 4. FINS：术后1W起，手术组FINS即出现下降趋势，术后4W与对照组相比明显下降（P0.05，，n=8）。到术后6W与术前和对照组相比均显著下降（P0.01，n=8）； 5. GLP-1：手术组空腹GLP-1水平在术后1W开始上升，与对照组相比明显上升（P0.01，n=8）。于术后2、4、6W与对照组相比均显著上升（P0.001，n=8）。 6.空腹甘油三酯：虽然手术组自术后1周开始呈下降趋势，但在术后4周与术前相比并无差异无统计学意义，P0.05。 7.通过FINS与FFA的相关性分析可看出，血FINS与FFA呈正相关关系（r=0.494），且二者在同一时间点与对照组相比出现显著下降（术后6周），说明FFA可能是FINS下降的重要因素。 8.通过血浆胰岛素水平和大鼠体重直线相关分析后可看出，血浆胰岛素水平和大鼠体重呈负相关关系（r=-0.324）。 9.通过GLP-1与空腹胰岛素以及空腹游离脂肪酸进行相关性分析，可得出结论：GLP-1与胰岛素和游离脂肪酸均呈负相关（r=-0.324和r=-0.362）。 10．手术前后粪便的变化：两组大鼠的粪便性状在术后的前3天较少，较稀。待转为固体饮食后则与术前无较大的区别。 11.手术前后大鼠十二指肠HE染色结果：通过光镜下观察示：2组大鼠手术前后的十二指肠在光镜下的粘膜结构清晰，可清晰见到粘膜绒毛和腺体结构。腺体细胞在数量上没有明显差别。并且可以看出在术后肠内粘液有所增多。 结论 1．成功建立肥胖大鼠十二指肠-上段空肠腔内套管术模型。 2.十二指肠-上段空肠内管术的减重效果明显，且减重效果与置入体内的导管长度有关，长度越长，体重增加越慢。原因可能与术后摄食量的减少和GLP-1分泌增多相关。 3.十二指肠-上段空肠内置管较长的手术组在术后血GLP-1水平较对照组显著升高，可能与食物经过薄膜管后直接与下段空肠和回肠接触，刺激L细胞分泌大量GLP-1有关。同时通过脑-肠轴快速产生饱感反应，降低食欲，使摄食量减少，也是导致体重下降的原因。 4.在置管术后套管较长的手术组大鼠随着体重的减轻，血FINS和FFA也呈逐渐下降趋势，在一定程度上缓解了高胰岛素血症，从而使胰岛素敏感性得到了相应改善。通过二者的相关性分析可看出，血FINS与FFA呈正相关关系。说明FFA可能是FINS下降的重要因素。 5.经过直线相关分析后提示：血浆胰岛素水平和大鼠体重呈负相关关系。GLP-1与胰岛素和游离脂肪酸均呈负相关。 6.通过对比手术和前后的十二指肠组织学切片发现术后肠组织并未产生明显异常变化，说明短期内此套管术在动物体内是安全的。
【关键词】：十二指肠-空肠腔内套管术 GLP-1 胃肠减重外科手术 高脂饮食诱导肥胖大鼠 高胰岛素血症
【学位授予单位】：第四军医大学
【学位级别】：硕士
【学位授予年份】：2014
【分类号】：R-332;R589.2
【目录】：

• 缩略语表5-7
• 中文摘要7-11
• Abstract11-16
• 前言16-18
• 文献回顾18-28
• 0 引言28-29
• 1 实验材料29-30
• 1.1 实验用动物29
• 1.2 实验分组29
• 1.3 实验材料29
• 1.4 实验主要试剂29-30
• 1.5 实验仪器和设备30
• 1.6 手术器械及物品准备30
• 2．实验方法30-38
• 2.1 十二指肠-空肠腔内置管手术30-33
• 2.2 标本采集-大鼠眼眶取血33
• 2.3 观察指标和测定方法33-36
• 2.4 石蜡切片的制备：36-37
• 2.5 石蜡切片的苏木精-伊红（HE）染色37-38
• 2.6 统计学处理38
• 3 结果38-44
• 3.1 一般情况38
• 3.2 手术前后 2 组大鼠体重的变化情况38-39
• 3.3 手术前后两组大鼠摄食量的变化39
• 3.4 手术前后大鼠 FFA 的变化39-40
• 3.5 手术前后大鼠空腹胰岛素（FINS）变化40-41
• 3.6 手术前后大鼠空腹 GLP-1 的变化41-42
• 3.7 手术前后大鼠空腹甘油三酯的变化42
• 3.8 手术前后粪便的变化42
• 3.9 手术前后 2 组大鼠十二指肠 HE 染色结果42-44
• 4 讨论44-49
• 小结49-51
• 参考文献51-61
• 附录61-66
• 个人简历和研究成果66-67
• 致谢67

【引证文献】

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1 李文艳;霍瑾璇;;高脂低碳水化合物膳食模式对肥胖大鼠影响的研究[J];临床和实验医学杂志;2015年16期

  本文关键词：十二指肠—空肠套管大鼠模型的建立及对高脂饮食诱导的肥胖伴高胰岛素血症大鼠影响的研究，由笔耕文化传播整理发布。

本文编号：389985