Blimp1mRNA在RA患者外周单个核细胞的表达及IL-21对其调节作用研究

发布时间：2017-05-25 14:19

  本文关键词：Blimp1mRNA在RA患者外周单个核细胞的表达及IL-21对其调节作用研究，由笔耕文化传播整理发布。

【摘要】：背景与目的 类风湿性关节炎（Rheumatoid arthritis,RA）是一种病因不明的慢性系统性自身免疫性疾病，以对称性滑膜关节炎进而导致进行性关节破坏为特征，在成人中发病率达0.5%。RA患者滑膜易形成滤泡外生发中心，进而B细胞在局部炎症中发挥作用并产生记忆B细胞和浆细胞，，这些局部反应引起免疫系统活化最终导致RA患者关节破坏。过去的几十年里普遍认为RA主要由T细胞和巨噬细胞介导，二者是RA病理生理改变的主要参与者，最近抗-CD20抗体如利妥昔单抗治疗诱导B细胞清除对难治性RA患者的显著临床疗效表明B细胞是RA发病机制的主要参与者。作为近几年新发现的一种T细胞亚群，Tfh细胞（Tfollicular helper cells,滤泡辅助T细胞）参与了自身免疫性疾病的发病，研究发现其促进了生发中心（germinal center, GC）的自发形成和高亲和力自身抗体的异常阳性选择。该细胞可通过CD40L传递辅助信号，其与B细胞的直接接触引起CD40L-CD40结合，进而引起B细胞NF-k B活化和IRF（4Interferon regulatoryfactor4,白介素调节因子4）上调，IRF4反过来下调BCL6（B-cell lymphoma6protein, B细胞淋巴瘤蛋白6）进而为GC后B细胞分化创造条件，此外也通过产生IL-21（Interlukin21,白介素21）等细胞因子发挥生物学作用。IL-21能够直接作用于B细胞控制GC形成并通过活化STAT3（Signal transducer and activatorof transcription3，信号转导及转录激活蛋白3）促进B细胞终末分化为浆细胞，其能否通过作用于其他下游信号分子参与浆细胞发育值得进一步探索。作为浆细胞发育的三个关键转录因子（STAT3，IRF4，Blimp1）之一，B淋巴细胞诱导成熟蛋白1（B lymphocyte induced maturation protein1,Blimp1）在B细胞终末分化为浆细胞和浆细胞分泌高水平免疫球蛋白过程中发挥关键转录调节作用，但其在自身免疫病领域研究较少，而IL-21对其是否存在调节作用也有待研究。本实验研究IL-21、Blimp1mRNA在RA患者体内的表达及IL-21对体外培养RA患者外周单个核细胞（peripheral blood mononuclear cells,PBMCs）Blimp1表达和B细胞CD20表达的影响，进一步探索IL-21参与RA发病的具体作用机制。 材料与方法 1.选取2012年10月至2013年3月在郑州大学第一附属医院风湿科住院的30例RA患者和30名健康体检人员作为实验对象。 2.采用ELISA方法检测RA患者和健康对照血浆IL-21水平；同时检测记录患者临床指标DAS28和抗CCP抗体同其IL-21水平进行相关性分析。 3.实时荧光定量PCR（QTR-PCR）检测RA患者PBMCs Blimp1mRNA表达水平，同健康对照进行比较分析。 4.分离PBMCs进行体外培养，设立阴性对照组、CD40L组、IL-21组和CD40L加IL-21组，以IL-21和/或CD40L刺激细胞72小时后实时荧光定量PCR检测各组细胞Blimp1mRNA表达水平并进行组间比较。 5.分离PBMCs进行体外培养，设立阴性对照组、CD40L组、IL-21组和IL-21加CD40L组,以IL-21或CD40L刺激细胞96小时后流式细胞术检测各组细胞CD20阳性B细胞所占比例。 结果 1.同健康对照(21.26±6.35ng/L)比较，RA患者血清IL-21水平(126.31±12.68ng/L)明显升高(t=-23.185，P＜0.05)，且IL-21水平同RA患者DAS28(r=0.102)和抗CCP抗体(r=0.083)具有相关性(P＜0.05)。 2. RA患者PBMCs Blimp1mRNA表达水平（1.216±0.21）明显高于健康对照（1.000±0.00）（Z=-2.41，P＜0.05)。 3.对照组（1.000±0.000）和CD40L组（1.008±0.027）Blimp1mRNA表达水平无统计学差异，IL-21组（1.084±0.029）和CD40L加IL-21组（1.157±0.028）Blimp1mRNA表达水平明显高于对照组(P＜0.05)，CD40L加IL-21组Blimp1mRNA表达水平高于IL-21组(P＜0.05)。 4. CD40L组（2.42±0.35）、IL-21组（2.63±0.33）和IL-21加CD40L组（5.60±0.42）较阴性对照组（1.62±0.14）CD20阳性B细胞比例(%)增加，IL-21加CD40L组较CD40L组和IL-21组CD20阳性B细胞比例增加，差异均具有统计学意义(P＜0.05)。 结论 RA患者IL-21水平较健康对照升高，且同患者疾病活动指标DAS28评分和抗CCP抗体水平相关，因此IL-21可能参与了RA的发病过程且与浆细胞功能有关； RA患者PBMCs Blimp1mRNA较健康对照表达增加，Blimp1异常表达可能参与了RA的发病；IL-21可能通过调节Blimp1表达促进B细胞的分化成熟进而参与RA的发病。
【关键词】：类风湿性关节炎IL-21 Blimp1
【学位授予单位】：郑州大学
【学位级别】：硕士
【学位授予年份】：2014
【分类号】：R392
【目录】：

• 摘要4-7
• Abstract7-12
• 中英文缩略词表12-14
• 引言14-18
• 材料与方法18-27
• 结果27-32
• 讨论32-38
• 结论38-39
• 参考文献39-43
• 综述43-65
• 参考文献61-65
• 个人简历65-67
• 致谢67

【参考文献】

中国期刊全文数据库 前1条

1 王筠;徐玉萍;;专业研究发展趋势的预测模型——以竞争情报研究为例[J];情报杂志;2010年07期

  本文关键词：Blimp1mRNA在RA患者外周单个核细胞的表达及IL-21对其调节作用研究，由笔耕文化传播整理发布。

本文编号：394007