生物反应器微载体规模化培养轮状病毒重配株LH9

发布时间：2017-05-28 00:06

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【摘要】：目的利用Vero细胞生物反应器微载体培养技术规模化培养轮状病毒重配株LH9(G4型)。方法用3 L生物反应器,以4 g/L载体浓度培养Vero细胞,待细胞浓度达1.8×106个/ml时,分别用含2、1、0.75、0μg/ml胰酶的DMEM培养液,35℃连续培养21 d,观察细胞生长状态。分别按0.5、0.1、0.05、0.01 MOI接种轮状病毒重配株LH9(G4),培养过程中每日取样,检测病毒滴度以及葡萄糖、乳酸含量。根据培养过程中葡萄糖、乳酸含量的变化,确定病毒培养过程中的收获时间,优化培养工艺。结果在反应器中用含不同浓度胰酶的DMEM培养Vero细胞,细胞形态良好,与不含胰酶的DMEM培养液培养的细胞无明显差异;按0.05 MOI接种后的病毒收获液滴度较高,可达7.0 lg CCID50/ml,且持续时间较长;通过对病毒培养液中葡萄糖、乳酸含量的监测,调整了培养过程中的收获时间,收获次数增加至4次,可收获病毒液4个工作体积,病毒高峰滴度可达8.5 lg CCID50/ml。结论采用生物反应器微载体系统培养轮状病毒重配株LH9(G4),可显著提高病毒滴度,通过对培养过程的优化,增加了病毒收获量,为进一步规模化生产轮状病毒疫苗奠定了基础。
【作者单位】： 兰州生物制品研究所有限责任公司第六研究室;
【关键词】： 生物反应器 微载体 轮状病毒
【基金】：2014年甘肃省战略性新兴产业创新支撑项目
【分类号】：R373
【正文快照】： 人轮状病毒(human rotavirus,HRV)是世界上引起5岁以下儿童重症腹泻的首位病原体[1-2],可引起持续多日的腹泻和呕吐,严重者可导致死亡,大部分患病儿童需要医疗干预或入院治疗,但目前尚无特效的治疗方法,且该病病程较长,给医生和患者均造成了很大负担。因此,开发安全有效的疫苗

【参考文献】

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4 张U，

本文编号：401467