M-CSF与L929细胞培养上清诱导分化骨髓巨噬细胞的差异分析

发布时间：2017-05-31 06:04

  本文关键词：M-CSF与L929细胞培养上清诱导分化骨髓巨噬细胞的差异分析，，由笔耕文化传播整理发布。

【摘要】：[目的]通过比较常用的M-CSF与L929细胞培养上清两种诱导方式获得骨髓巨噬细胞(BMDM)的形态及基本生物学功能,为选择制备BMDM的方法提供实验依据。[方法]用两种方式诱导小鼠骨髓获取BMDM,然后分别利用Zeiss荧光显微镜和流式细胞仪比较BMDM的细胞形态及纯度;通过吞噬实验、杀菌实验以及液相芯片技术(liquid chip)比较两组BMDM的生物学功能;同时将上述结果与体内分化成熟的腹腔巨噬细胞相比较。[结果]两组诱导分化成熟的BMDM均呈现不规则形或梭形;BMDM的纯度分别为M-CSF组98.6%,L929上清组99.6%;腹腔细胞贴壁后巨噬细胞的纯度是98.8%;吞噬实验、杀菌实验两组之间及其与腹腔巨噬细胞相比无显著差异;炎症因子释放水平检测中3组细胞存在IL-6或TNF-α某些时间点释放水平差异。[结论]M-CS与L929上清诱导方式所获得BMDM的形态相似,纯度相近(98.6%比99.6%),吞噬细菌能力无显著统计学差异(21.31±5.83比26.10±6.11,t=-0.745,P0.05),杀菌能力无显著差异(杀菌30min:36.41%±4.21%比39.53%±6.75%;60min:44.35%±6.75%比45.27%±1.96%,两者均P0.05),但是炎症因子释放的某些时间点有差异(TNF-α的释放在LPS刺激后24 h M-CSF组高于L929组:549.92±412比271.47±432,t=-0.34,P0.05),应根据实验目的选择获取BMDM的诱导方式。
【作者单位】： 广东省蛋白质组学重点实验室南方医科大学病理生理学教研室;
【关键词】： M-CSF L细胞上清 骨髓巨噬细胞 腹腔巨噬细胞
【基金】：国家自然科学基金项目(“组蛋白修饰对内毒素血症炎症介质释放的调控”,No.81072425;“NF-κB p65活化在调控细菌脂蛋白耐受巨噬细胞杀菌能力中的作用及其相关分子机制”,No.81272149)资助~~
【分类号】：R392
【正文快照】： 0引言巨噬细胞具有非常重要的生物学功能。当病原体进入机体时,巨噬细胞能够迅速清除病原微生物发挥非特异性免疫防御作用[1];其次,巨噬细胞还能通过释放多种细胞因子广泛参与炎症、肿瘤免疫、止血、组织修复等过程,与此同时其自身的功能状态也受到局部微环境的影响。巨噬细胞

【参考文献】

中国期刊全文数据库 前1条

1 李雪;王义乾;罗海华;钟s檒

本文编号：408751