三维神经干细胞分化模型在神经药物检测中的应用

发布时间：2017-06-08 00:18

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【摘要】：将神经干细胞接种在透明质酸支架进行三维(3D)培养,使用传统平面(2D)培养做对比,经诱导培养基进行1,7,14 d诱导分化。采用细胞免疫组织化学和Real-time PCR技术检测神经干细胞特异性标记物巢蛋白(nestin)、神经元微管蛋白(tubulin)及胶质细胞胶原纤维酸性蛋白(glial fi brillary acidic protein,GFAP)在蛋白水平和m RNA水平上的变化;CCK-8和活细胞染色技术检测神经细胞的增殖能力及神经细胞膜损伤修复效果。结果显示,神经干细胞在3D和2D培养条件下经诱导培养基诱导14 d后,tubulin表达量明显增加,而GFAP表达量降低,3D效果更加明显。CCK-8和活细胞染色结果显示,干细胞在3D培养条件下较2D培养条件下其分化和分化后的神经细胞膜损伤修复效果显著。三维培养模型能够对神经细胞分化后的药物损伤模型起到更好的保护作用。因此认为,3D透明质酸 神经细胞分化模型是更适合于构建体外神经药物筛选及安全性检测的优势模型。
【作者单位】： 天津卫凯生物工程有限公司;天津中医药大学天津市现代中药重点实验室;英国牛津大学生物医学工程研究所;
【关键词】： 神经干细胞分化 D培养 透明质酸 体外药物检测模型 膜损伤修复
【基金】：国家科技部国际合作项目(批准号:2011DFA31960)资助的课题~~
【分类号】：R329
【正文快照】： 3英国牛津大学,生物医学工程研究所,牛津OX13PJ)目前普遍使用的神经细胞体外培养方法多为单层贴壁培养(2D)以及3D无支架神经球培养。单层贴壁培养以1952年Dulbecco开展的单层传代培养为代表[1],标志着进入了细胞体外研究时代。此种方法优点包括操作简单、环境可控性强、样品特

【参考文献】

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【共引文献】

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3 贾延R

本文编号：430801