羟基磷灰石分离纯化抗TNF-α单克隆抗体

发布时间：2017-06-08 20:10

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【摘要】：目的用填料为羟基磷灰石的层析柱纯化抗TNF-α单克隆抗体。方法经protein A为填料的层析柱纯化抗TNF-α单克隆抗体后,通过Do E实验设计,对填料为羟基磷灰石的层析柱的洗脱流速、p H值及盐浓度进行优化,确定最佳洗脱条件后,进行抗TNF-α单克隆抗体的纯化,纯化产物经HPLC及毛细管电泳法检测其浓度、多聚体含量及纯度。结果抗TNF-α单克隆抗体经protein A层析纯化后,回收率达96.1%,纯度为96.0%,多聚体含量下降至1.9%。通过Do E优化,筛选出最佳条件范围为:流速1~3 ml/min,0.25~0.30 mol/L Na Cl,p H 7.0~7.3,选定1 ml/min流速、0.25 mol/L Na Cl、p H 7.0、作为洗脱条件进行纯化,回收率为93.1%,纯度为97.3%,多聚体含量为0,优于参比制剂。结论将羟基磷灰石用于抗TNF-α单克隆抗体的中度纯化,获得符合参比制剂质量的产品。
【作者单位】： 广东东阳光药业有限公司;
【关键词】： 羟基磷灰石 肿瘤坏死因子-α 单克隆抗体 纯化
【基金】：广东省引进创新科研团队计划资助(201101Y0104990178)
【分类号】：R392
【正文快照】： 肿瘤坏死因子-α(tumor necrosis factor-α,TNF-α)是由单核巨噬细胞激活后分泌的一种细胞因子,能够与特异受体结合,发挥多种生物学效应,包括炎症反应、免疫激活、细胞生长相关基因激活表达、抑制或杀伤肿瘤细胞等[1-4]。研究证明,TNF-α与机体炎症反应密切相关,类风湿关节炎

【参考文献】

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1 杜春红;唐雪;石丽媛;王鹏;杨光璨;董珊珊;宋志忠;;应用羟基磷灰石层析分离纯化鼠疫菌Pla蛋白的研究[J];疾病预防控制通报;2011年05期

2 马泓冰;孙中文;徐颖;李文香;陶然;陈洁;张学光;;两步串联层析法纯化鼠抗人CD28单克隆抗体2F5[J];细胞与分子免疫学杂志;2007年02期

3 缪小牛;陈卫;张娟;解伟;王e，

本文编号：433619