猪Lp-PLA2多克隆抗体制备

发布时间：2017-06-09 02:08

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【摘要】：制备猪脂蛋白相关磷脂酶A2(Lp-PLA2)多克隆抗体,有利于研究猪Lp-PLA2与炎症发生的相关性。本试验利用基因克隆技术构建猪Lp-PLA2原核表达载体,表达重组蛋白,并对表达条件进行优化;使用Ni-NTA树脂亲和层析纯化该蛋白质,免疫家兔,制备猪Lp-PLA2多克隆抗体;并用western blot对获得的抗体进行免疫检测。电泳结果显示猪Lp-PLA2原核表达载体构建成功;SDS-PAGE结果表明,猪Lp-PLA2在1 mol/L IPTG、37℃条件下,表达于菌体中;western blotting显示,该抗体与猪源Lp-PLA2有良好的交叉反应。因此,该多克隆抗体的制备为进一步利用猪作为动物模型研究炎症性疾病奠定了基础。
【作者单位】： 北京军区总医院中心实验科;
【关键词】： 猪 脂蛋白相关磷酯酶A 原核表达 多克隆抗体
【分类号】：R392;Q78
【正文快照】： 脂蛋白相关磷脂酶A2(Lp-PLA2)又称血小板活化因子乙酰水解酶,是钙离子非依赖性的磷脂酶(Larsson等,1999)。Lp-PLA2主要由单核细胞、巨噬细胞、T淋巴细胞和肥大细胞产生和分泌(Hakkinen等,1999)。研究表明Lp-PLA2通过短的sn-2酯键作用于磷脂的水溶部分,产生两种炎症介质:溶血卵

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本文编号：434225