不同红色荧光蛋白在酵母细胞中的表达效果分析

发布时间：2017-06-09 20:16

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【摘要】：目的比较不同红色荧光蛋白基因在酵母细胞中的表达效果。方法利用分子生物学方法,构建了4种红色荧光蛋白(DsRed)基因酵母报告载体,分别是p GPD-DsRed、p GPD-DsRed-express-2、p GPD-y DsRed和p GPDy DsRed-express-2,后两者含有酵母细胞偏好性的密码子,将4种DsRed酵母报告载体转入W303-1A酵母细胞,利用倒置荧光显微镜观察DsRed的表达,并用多功能酶标仪测酵母细胞的发光强度。结果各红色荧光发光强度明显不同,其中DsRed-express-2发光最强,其次是y DsRed-express-2,y DsRed发光强度最弱。结论在酵母细胞中红色荧光蛋白的强度与密码子偏好性无关;定量红色荧光蛋白表达强度最好选用DsRed-express-2报告基因。
【作者单位】： 扬州大学医学院预防医学教研室;
【关键词】： 红色荧光蛋白 密码子偏好性 酵母细胞 聚合酶链反应
【基金】：国家自然科学基金资助项目(81241099)
【分类号】：R3416
【正文快照】： 红色荧光蛋白(DsRed)基因是从珊瑚虫(Discosoma genus)中克隆出的一种蛋白基因。Clontech公司对其基因编码进行了人工改造,分别形成两种突变体,命名为DsRed1和DsRed2。DsRed由于激发和发射波长较长,其发射峰位于培养基、组织培养器材及细胞成分等产生的荧光背景范围之外,具有

【参考文献】

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本文编号：436599