无血清悬浮分离培养法分离、培养、鉴定脊髓源性神经干细胞

发布时间：2017-06-10 13:07

  本文关键词：无血清悬浮分离培养法分离、培养、鉴定脊髓源性神经干细胞，，由笔耕文化传播整理发布。

【摘要】：背景:目前临床上尚未发现完全治愈脊髓损伤,使其达到结构及功能恢复的治疗方法。已有的神经营养因子治疗方法促进神经细胞再生的效果有限,而干细胞移植治疗可能是现阶段修复脊髓损伤的有效方法之一。目的:无血清悬浮分离培养法培养胎鼠脊髓源性神经干细胞,采用形态学、免疫荧光技术和多向分化能力进行神经干细胞鉴定。方法:应用悬浮分离培养法,培养纯化孕13.5 d C57BL/6胎鼠的脊髓源性神经干细胞。倒置显微镜观察细胞形态学变化;CCK-8法检测细胞的增殖能力。免疫荧光技术检测Nestin和Sox2表达;使用自然分化法验证第4代脊髓源性神经干细胞多向分化特性,明确其分化能力。结果与结论:采用无血清悬浮分离培养法可以顺利获取脊髓源性神经干细胞。培养的脊髓源性神经干细胞增殖活性良好,高表达Nestin和Sox2,且两种标记物与DAPI核染高度均匀吻合,说明细胞纯度高。进一步诱导分化显示,细胞可以向GFAP和Tuj1阳性细胞分化,证明脊髓源性神经干细胞分化潜能较好。该实验可建立一套体外培养脊髓源性神经干细胞分离、培养、纯化及鉴定体系,为后续神经干细胞的应用研究奠定基础。
【作者单位】： 解放军第二军医大学附属长海医院脊柱外科;
【关键词】： 神经干细胞 培养基 无血清 组织工程 干细胞 培养 脊髓源性 无血清悬浮分离培养法 鉴定 国家自然科学基金
【基金】：国家自然科学基金(31371011),项目名称:组织特异性仿生微电流场构建及其对脊髓损伤后内源性神经干细胞的调控作用~~
【分类号】：R329
【正文快照】： 0引言Introduction脊髓损伤是一种以脊髓结构破坏,功能细胞凋亡为主要表现的损伤,其病理机制主要为神经元的损失、轴突联系的中断,以及渐进性的脱髓鞘病变。目前临床上尚未发现完全治愈脊髓损伤,使其达到结构及功能恢复的治疗方法。已有的神经营养因子治疗方法,促进神经细胞再

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本文编号：438562