程序性细胞死亡因子4是替代活化巨噬细胞的新分子标志物
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【摘要】:背景:程序性细胞死亡因子4的表达水平与经典活化的巨噬细胞的表型负相关,但是程序性细胞死亡因子4的表达水平与巨噬细胞替代活化的关系仍不明确。目的:观察替代活化的巨噬细胞中程序性细胞死亡因子4的表达水平改变,及其对替代活化的影响。方法:用白细胞介素4、地塞米松单独刺激或联合刺激诱导NR 8383细胞的替代活化;采用qP CR检测巨噬细胞替代活化的分子标志物的表达水平,确定诱导巨噬细胞替代活化的最适条件;采用qP CR和Western blot检测替代活化的巨噬细胞模型中程序性细胞死亡因子4表达的改变;分别用大鼠程序性细胞死亡因子4高表达质粒和程序性细胞死亡因子4干扰质粒转染NR 8383细胞株,采用荧光倒置显微镜观察转染的效率,并检测程序性细胞死亡因子4的表达水平;分别检测程序性细胞死亡因子4高表达和程序性细胞死亡因子4敲低后NR 8383细胞株中巨噬细胞经典活化和替代活化的分子标志。结果与结论:(1)白细胞介素4和地塞米松联合刺激比白细胞介素4或地塞米松单独刺激可更有效的诱导巨噬细胞的替代活化;10μg/L白细胞介素4+50 nmol/L地塞米松刺激24 h可有效诱导巨噬细胞的替代活化。(2)在替代活化的巨噬细胞中程序性细胞死亡因子4的表达水平显著升高,是替代活化的分子标志。(3)程序性细胞死亡因子4高表达上调替代活化的分子标志的表达(P0.05);而敲低程序性细胞死亡因子4可下调CD206的表达(P0.05),并显著上调经典活化的分子标志诱导型一氧化氮合酶的表达(P0.05)。结果表明程序性细胞死亡因子4上调是替代活化巨噬细胞的一个重要分子标志物。
【作者单位】: 陕西省微生物研究所;西安交通大学医学部基础医学院生物化学与分子生物学系;西安交通大学医学部基础医学院药理学系;西安交通大学第二附属医院儿科;
【关键词】: 巨噬细胞 白细胞介素 地塞米松 组织构建 组织工程 程序死亡因子 替代活化 国家自然科学基金
【基金】:国家自然科学基金资助项目(81370123)~~
【分类号】:R329.2
【正文快照】: 0引言Introduction化是与经典活化相对应的另一种巨噬细胞的活化形式,但巨噬细胞在维持组织平衡以及协调炎症的各个方面都有关程序性细胞死亡因子4与巨噬细胞替代活化的关系却发挥了重要的作用[1-2]。巨噬细胞在微环境的刺激下形成表型研究很少。和功能各异的亚群,它们消除病
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