粉尘螨1类变应原T细胞表位重组蛋白的构建及鉴定

发布时间：2017-06-11 14:09

  本文关键词：粉尘螨1类变应原T细胞表位重组蛋白的构建及鉴定，，由笔耕文化传播整理发布。

【摘要】：目的构建Der f1的T细胞表位融合肽基因的原核表达载体并表达鉴定。方法利用基因工程方法构建Der f1的T细胞表位融合肽嵌合基因,命名为Der f1T,并插入到原核表达载体p ET28a(+)中,形成重组原核表达载体p ET28a(+)-Der f1T,进行双酶切和测序验证后的阳性克隆转化到E.coli BL21(DE3)诱导其表达。制样进行SDS-PAGE分析表达产物,再进行纯化,并Western bloting鉴定表达的蛋白。ELISA法测定重组蛋白对粉尘螨过敏的患者血清Ig E抗体的结合能力。结果双酶切和测序结果说明原核表达载体p ET28a(+)-Der f1T构建成功;SDS-PAGE说明Der f1T诱导且纯化成功;Western bloting进一步说明Der f1T蛋白纯化成功;ELISA试验结果说明Der f1T对粉尘螨过敏的患者血清中Ig E结合能力与Der f1相比明显下降(P0.05)。结论成功表达Der f1的T细胞表位重组蛋白,为后续粉尘螨过敏患者提供特异性免疫治疗奠定基础。
【作者单位】： 安徽理工大学医学院病原生物学教研室;皖南医学院寄生虫学教研室;
【关键词】： 哮喘 粉尘螨 特异性免疫治疗 T细胞表位
【基金】：国家自然科学基金(81270091,30872367) 安徽省自然科学基金(070413088)
【分类号】：R392
【正文快照】： 近几十年来全球过敏性疾病患病率急剧上升,80%的患者对尘螨过敏,其影响面覆盖全人类[1]。尘螨是人类室内最主要的过敏原来源,能够引起过敏性哮喘、过敏性鼻炎、皮炎等疾病[2,3]。尘螨品种众多,而粉尘螨1类变应原(Der f1)被认为是最主要的变应原之一[4]。人类的研究表明,变应原

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1 蔡黎,项t

本文编号：441759