不同潮气量机械通气后大鼠支气管肺泡灌洗液内HSP70水平和肺损伤关系的研究

发布时间：2017-06-13 15:16

本文关键词：不同潮气量机械通气后大鼠支气管肺泡灌洗液内HSP70水平和肺损伤关系的研究，由笔耕文化传播整理发布。

【摘要】：目的:研究支气管肺泡灌洗液中热休克蛋白70(HSP-70)、细胞因子在机械通气肺损伤中的作用机制。观察不同潮气量机械通气后大鼠支气管肺泡灌洗液(BALF)内热休克蛋白(HSP-70)含量的变化；观察不同潮气量机械通气后BALF内细胞因子白介素6（IL-6）、巨噬细胞炎性蛋白2（MIP-2）含量的变化，及其与BALF内热休克蛋白(HSP-70)含量的关系；观察不同潮气量机械通气后肺组织的肺损伤评分和凋亡指数，及其与BALF内热休克蛋白(HSP-70)含量的关系。方法:雄性SD大鼠36只，随机分为3组，大潮气量机械通气组（HV）、小潮气量机械通气组（LV）、正常对照组(N)。大鼠麻醉后，颈部皮肤消毒后行气管切开插管固定，并以电热垫维持大鼠体温在37摄氏度左右。HV组， LV组均连接小动物呼吸机以行机械通气；N组保留自主呼吸室内空气，单笼饲养。HV、LV组潮气量（V t）值分别为25ml/kg，7mL/kg，通气时间4h，吸呼比1：2。10%水合氯醛（0.3mL/kg）腹腔注射麻醉后，每半小时追加首剂的1/3，维持大鼠麻醉状态。在机械通风后，处死大鼠用生理盐水肺灌洗。收集的BALF经离心后，上清液分装保存在-80°C冰箱中以供将来使用。(1)BALF离心后，沉渣重新悬后，光学显微镜下用细胞计数板行白细胞计数，及涂片瑞氏染色后行白细胞分类计数；(2)采用BCA方法测定大鼠BALF中总蛋白质浓度的含量；采用ELISA方法测定大鼠BALF中HSP-70和IL-6、MIP-2的含量；(3)肺组织石蜡切片后行苏木素-伊红（HE）染色，光镜下观察病理学变化及行肺损伤评分，评估肺组织的损伤程度；(4)采用末端脱氧核苷酸转移酶介导的dUTP缺口末端标记测定法（TUNEL法）检测肺组织石蜡切片的细胞凋亡情况，评估肺组织细胞的凋亡指数。结果:1.与正常对照组比较，小潮气量机械通气组和大潮气量机械通气组大鼠BALF中白细胞计数及中性粒细胞分类计数均显著性升高(P0.05)。2.与正常对照组比较，小潮气量机械通气组和大潮气量机械通气组大鼠BALF中HSP-70、IL-6、MIP-2水平以及肺损伤病理评分、肺凋亡指数均显著性升高(P0.05)。3.与小潮气量机械通气组比较，大潮气量机械通气组大鼠BALF中HSP-70、IL-6、 MIP-2的水平以及肺损伤病理评分、肺凋亡指数也均显著性升高(P0.05)。4.大潮气量机械通气组大鼠BALF中IL-6、MIP-2以及肺损伤病理评分别与HSP-70呈显著正相关（P=0.01, r=0.8538; P=0.01, r=0.8919; P=0.01, r=0.8852）。结论:1）大潮气量机械通气可致肺上皮细胞损伤或坏死增加，HSP-70释放到气道内的量明显增加，促进细胞因子释放；而肺内炎症反应显著增强，可能进一步加重肺组织的损伤及细胞凋亡的发生。 2）小潮气量机械通气相对大潮气量机械通气，肺上皮细胞损伤或坏死程度较轻，HSP-70胞外释放及细胞因子较少，肺内炎症反应较轻，细胞凋亡少。 3）因此机械通气时，，机械牵拉造成肺组织细胞的损伤，细胞内HSP-70释放入气道，促进细胞因子的释放，加重肺部炎症反应，促进肺组织细胞凋亡的发生。
【关键词】：机械通气肺损伤 热休克蛋白70 白细胞介素6 巨噬细胞炎症蛋白2 凋亡
【学位授予单位】：安徽医科大学
【学位级别】：硕士
【学位授予年份】：2013
【分类号】：R363
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